Содержание

Панель (торпедо) для Лада Гранта – ВАЗоригинал.ру

Во всех автомобилях Лада Гранта на самом видном месте, а именно в центральной части панели приборов (торпедо), расположена центральная консоль. Проще говоря, это пластиковое обрамление основных элементов управления, таких как: магнитола, климат контроль и кнопок управления различными функциями автомобиля. На первый взгляд штатная деталь, ничего интересно, но так ли это?

Для тех кто занимается тюнингом салона эта запчасть представляет большой интерес. Чаще всего её перекрашивают в различные цвета, обтягивают кожей или пленкой.

Так как спрос на такую доработку достаточно высокий, на данный момент различные производители тюнинг деталей предлагают большой выбор вариантов покрытия на любой вкус.

Для чего менять центральную консоль на Лада Гранта?

Попробуем более детально разобраться в этом вопросе. Поклонники качественного авто звука, естественно после покупки не новой машины первым делом ставят хорошую магнитолу вместо стандартной. И тут может появиться первая проблема, так как другая магнитола установленная вместо штатной оставит зазоры, что конечно негативно отразятся на стилистике интерьера. К тому же там постоянно будет скапливаться различный мусор. К счастью решение давно найдено, можно установить переходную рамку или поставить подходящую центральную консоль у которой посадочное место без проблем подойдет.

Или другой пример. Во время замены какой-нибудь детали салона, будь то кнопки регулировки печки или сопла воздуховодов вы случайно поцарапали или ударили консоль. После чего на ней появились трещины и Вам это конечно не понравится.

Эта проблема тоже довольно легко и просто решается путем замены консоли на аналогичную. Или если цвет родной вам уже надоел можно установить глянцевую, матовую или рисунком под дерево. Это в свою очередь украсить и придаст индивидуальности вашему интерьеру.

Будем подводить итого выше изложенного. Не имеет значения, делаете ли вы тюнинг салона, ставите качественный звук, просто обновляете потерявшую вид или сломанную консоль. Ничем не ограничивайтесь, ведь сейчас есть огромный выбор по привлекательным ценам.

Наш интернет-магазин VazOriginal.ru всегда рад помочь вам в решение самых сложных задач, обращайтесь!

LADA Granta универсал — Официальный сайт LADA

• Подушка безопасности водителя
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Аудиоподготовка

• Рейлинги
• 14» стальные диски
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14»

• Подушка безопасности водителя
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Розетка 12V

• Рейлинги
• 14» стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14»

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиоподготовка

• Рейлинги
• 14» стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 14» стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14»

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15» легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14»

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

Панель приборов Лада Гранта: варианты тюнинга

Салон авто Лада Гранта Люкс

Лада Гранта является флагманской моделью производственного концерна АВТОВАЗ. И хотя с момента появления этой машины на рынке прошло всего 3 года, она уже успела завоевать любовь большей части населения нашей страны. Произошло это потому, что при проектировании данного автомобиля крупнейший отечественный автопроизводитель наконец-то учел мнения потребителей и устранил большую часть недостатков, имевшихся в предыдущих моделях.

По сравнению с Ладой Калиной, созданной на той же платформе, была улучшена пассивная безопасность, в самой дешевой комплектации появился airbag в рулевой колонке, а панель приборов покрыли нескрипящим пластиком, сделав ее менее травмоопасной. Кроме того, впервые в истории отечественного автомобилестроения покупателям стала доступна отечественная машина с автоматической коробкой переключения передач (АКПП).

Лада Гранта — это тот автомобиль, тюнинг которого хочется проводить не для того, чтобы довести машину до нормального состояния, а чтобы произвести впечатление на других людей. Рассмотрим варианты улучшения панели приборов Лады Гранты.

Вернуться к оглавлению

Особенности передней панели автомобиля

Панель приборов Лада 2190 собрана всего из 39 деталей. Это на 13 меньше, чем в Ладе Калине. Доминирующий цвет торпедки в стандартной комплектации — черный. Исключение — цветные шкалы на ручке управления климат-контролем, спидометре и тахометре, а также зеленая подсветка мониторов бортового компьютера и аудиосистемы. Немного интереснее смотрится приборная панель в комплектации «люкс». Края воздуховодов и центральной консоли, а также туннель рычага переключения передач и дверные подлокотники в этой комплектации отделаны под хром.

На фото выше представлена передняя панель Лада Гранта Люкс.

Центральная консоль не загружена лишними кнопками. Вверху расположены воздуховоды, между ними помещается кнопка аварийной сигнализации. В центре панели установлена аудиосистема, а внизу размещаются дополнительные кнопки и ручки управления отоплением и вентиляцией салона.

Руль 3-спицевый, травмобезопасный. Рулевая колонка регулируется в 1 направлении в комплектациях «стандарт» и «норма» и в 2 направлениях, если авто сборки «люкс».

Комбинация приборов Лада Гранта довольно лаконичная. Слева — круглый тахометр с зеленой шкалой и красной стрелкой. Справа — круглый спидометр с оранжевой стрелкой и зеленой шкалой. А между ними размещен монитор бортового компьютера. Для вывода остальных показателей используются лампы-индикаторы.

Стандартная приборная панель

Комбинация приборов и индикаторов представлена на фото.

Тахометр.
Неполадки в системе управления мотором.
Левый поворот.
Аварийно низкое давление масла.
ABS.
Иммобилайзер.
Перегрев двигателя (температура +115°С и выше).
Аварийно низкий уровень тормозной жидкости.
Правый поворот.
Разряжена аккумуляторная батарея.
Спидометр.
ESC.
Запрещен переход на высшую передачу (у машин с АКПП).
Горит дальний свет.
Горят задние противотуманные фонари.
Горит ближний свет.
Горят передние противотуманные фары.
Кнопка сброса суточного пробега.
Монитор бортового компьютера.

В целом передняя панель автомобиля Лада Гранта оставляет неоднозначное впечатление. С одной стороны, отсутствие лишних кнопок и рычажков на приборной панели радует. Но с другой стороны, черная торпедка и тусклая комбинация приборов как будто сами просят провести хотя бы минимальный тюнинг, добавить яркости и контраста.

Вернуться к оглавлению

Тюнинг панели приборов Гранты

Улучшить дизайн торпедки автомобиля Лада Гранта очень легко. Для этого достаточно покрасить щиток центральной консоли светлой металлической краской. Такой простой тюнинг значительно облагородит интерьер салона вашего автомобиля.

Подсветка для приборов

Список необходимых материалов:

грунтовка для пластика;
растворитель;
краска;
прозрачный акриловый лак.

Алгоритм действий.

Снимаем передний щиток с центральной консоли.
Демонтируем с него воздуховоды, их кольца, кнопки, ручки и панель управления климатом.
Обезжириваем щиток и кольца воздуховодов растворителем. Для этого смачиваем в нем чистую ветошь и протираем ею каждый миллиметр окрашиваемых поверхностей.
После того как щиток и кольца обсохнут, дважды грунтуем их. Каждый раз ждем полного высыхания нанесенного слоя.
Покрываем загрунтованные детали металлической краской. Красить лучше с помощью баллончика или компрессора. Важно не наносить слишком много краски за раз, иначе будут потеки, они испортят внешний вид. Также важно дождаться полного высыхания ранее нанесенного слоя.
Затем покрываем щиток и кольца воздуховодов прозрачным лаком.
После того как лак высохнет, аккуратно устанавливаем передний щиток в центральную консоль.

Тюнинг завершен. Получившаяся в результате консоль значительно облагородит интерьер вашего автомобиля.

Lada Granta Седан 2021 обзор, комплектации и цены, характеристики

Обзор Granta Седан

Держит слово

Моя сила не в блеске внешних украшений и вещей. Не в достижениях виртуальной жизни. Моя сила в том, что я выполняю обещания. Не меняю мировоззрение раз в полгода, а иду к цели и помогаю другим достичь ее.

Новое в знакомом

А ведь правда, мы становимся лучше, умнее, опытнее, сильнее. Мы радуемся, открывая что-то новое в себе и рядом с собой. Замечаем, когда меняется действительно что-то важное – стиль, комфорт, возможности любимого автомобиля.

Новые диски 15»
Легкосплавные диски оригинального дизайна с чередующимися двухразмерными спицами и полированной поверхностью
Форсунки омывателя
перенесены с капота на облицовку ветрового окна — стильное и практичное решение
Современная форма кузова
Улучшенная аэродинамика автомобиля
Легкое открытие багажника
Наружная электрокнопка отпирания багажника — неотъемлемый атрибут современного комфорта и стиля
Большие зеркала
Гарантия отличной обзорности
Настройка сиденья водителя
Регулировка в диапазоне 40 мм

Забота о каждом

Что может сравниться с той радостью, когда дарят подарок, который ты давно хотел? Только радость человека, которому даришь то, о чем он давно мечтал. Но потребности даже близких людей иногда понять непросто. Хорошо, что есть машина, умеющая учитывать самые разные запросы.

Комфорт пассажиров
Перчаточный ящик с полочкой, два подстаканника и две ниши на облицовке тоннеля пола для мелких вещей и держателем для авторучки
Освещение салона
Функция задержки освещения салона после закрытия двери: освещение гаснет через 25 секунд или сразу после включения зажигания
«Проводи меня домой»
Функция задержки выключения света фар: забота о водителе и пассажирах даже после того, как они покидают машину

Акустический комфорт
Дополнительная шумоизоляция улучшает виброакустику салона: мягкие подкрылки в арках колес – из специального материала, эффективно гасит «пескоструй» и удары гравия
Датчик дождя
Незаменимая опция, когда ваш автомобиль окатят мутной водой из соседней лужи и при мелком дожде в долгой поездке
Просторный 5-местный салон
Удобно и практично: задний диван легко складывается в пропорции 2/3. Ограничители двери с функцией инерционного доводчика

Жизнь, приправленная мощностью

Гамма двигателей мощностью 87, 98 и 106 л.с. позволяет выбрать автомобиль в соответствии со своим стилем вождения.

Все моторы оснащены облегченной шатунно-поршневой группой, что улучшает характеристики и повышает ресурс.

Рабочий объем
1596 см
Мощность
87 л.с. (64 кВт) при 5100 об/мин
Момент крутящий
140 Нм при 3800 об/мин
Топливо
Бензин, min 95

Рабочий объем
1596 см
Мощность
98 л.с. (72 кВт) при 5600 об/мин
Момент крутящий
145 Нм при 4000 об/мин
Топливо
Бензин, min 95

Рабочий объем
1596 см
Мощность
106 л.с. (78 кВт) при 5800 об/мин
Момент крутящий
148 Нм при 4200 об/мин
Топливо
Бензин, min 95

Ответственность и безопасность

Мир скоростей требует повышенного внимания. И повышенной отдачи: я слежу не только за собой, но и помогаю близким. А технологии помогают мне – ощутимо и эффективно! Особенно когда это комплекс электронных помощников водителя.

Благодаря проработанной силовой структуре кузова и современным системам безопасности LADA Granta седан выполняет российские и европейские требования по защите водителя, пассажиров и пешеходов.

Подушки безопасности
Две фронтальные подушки безопасности – необходимая защита водителя и пассажира
ЭРА-ГЛОНАСС
Система экстренного оповещения работает даже в случае отключения аккумулятора
Задние датчики парковки
Более надежная страховка при маневрировании задним ходом

Система торможения (ABS+BAS)
Антиблокировочная система с усилителем экстренного торможения: сохранение устойчивости и управляемости автомобиля
Курсовая устойчивость (ESC)
Предотвращает занос автомобиля
Помощник на подъеме
Система HSA помогает при старте на подъёме. Ощущение уверенности при подъеме (доступно для комплектаций с АМТ)

Вождение с азартом

LADA Granta предлагает выбрать принципиально разные варианты трансмиссии. Для мегаполиса – «автомат». Для поселка – «механика».

Для абсолютно любых условий – автоматизированная трансмиссия (АМТ).

Механическая коробка передач

Надежность и четкость переключений. В LADA Granta применяется МТ с тросовым приводом: это улучшает виброкомфорт автомобиля. Благодаря немецкому механизму
переключения передач четкость и информативность выведены на уровень европейских аналогов. В механической коробке передач для 8-клапанного мотора внедрено новое передаточное число главной пары: 3,9 вместо 3,7. Новая трансмиссия повышает динамику автомобиля и обеспечивает уверенное ускорение.

Автоматизированная механическая трансмиссия

Две коробки по цене одной. С АМТ возможно двигаться как в полностью автоматическом, так и в ручном режимах. АМТ получила обновленные настройки, а также сокращенное время переключения передач. «Городской» режим позволяет легко двигаться в пробках. Функция зимнего режима обеспечивает комфортное трогание на скользких покрытиях. Спортивный режим – для уверенного и динамичного старта.

Автоматическая коробка передач

Обеспечивает классический функционал АТ, максимально комфортное переключение передач и движение в городском потоке.

Комплектации и цены

Подушка безопасности водителя
Крепления для детских сидений ISOFIX
Блокировка задних дверей от открывания детьми
Иммобилайзер
Дневные ходовые огни
Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
Система вспомогательного торможения (BAS)
Подголовники задних сидений 2 шт.
Подушка безопасности переднего пассажира
Подголовники задних сидений 3 шт.
Охранная сигнализация
Противотуманные фары
Система электронного контроля устойчивости (ESC) (в Comfort только для АТ)
Противобуксовочная система (TCS) (в Comfort только для AT)
Система помощи при трогании на подъеме (HSА) (только для АТ и АМТ)

Розетка 12V
Бортовой компьютер
Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40

Воздушный фильтр салона
Легкая тонировка стекол
Аудиоподготовка
Электроусилитель рулевого управления
Регулируемая по высоте рулевая колонка
Центральный замок
Электростеклоподъемники передних дверей
Обогрев наружных зеркал
Кондиционер
Подогрев передних сидений
Электропривод и обогрев наружных зеркал
Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика
Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
Сиденье водителя с регулировкой по высоте
Центральный замок с дистанционным управлением
Электростеклоподъемники задних дверей
Обогрев ветрового стекла
Климатическая система
Датчики парковки задние
Датчики дождя и света

14» стальные диски
Запасное полноразмерное стальное колесо 14»
Колпаки колес декоративные
Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
Наружные ручки дверей в цвет кузова
Молдинги боковых дверей
15» легкосплавные диски
Запасное стальное колесо временного использования 14»

Характеристики

Расположение двигателя
Длина / ширина / высота, мм
База, мм
Объем багажного отделения в пассажирском / грузовом. ..
Колесная формула / ведущие…
Тип кузова / количество…
Количество мест
Колея передних / задних колес,…
Дорожный просвет под силовым агрегатом (полная…

Тип двигателя
Система питания
Рабочий объем, куб. см
Код двигателя
Количество, расположение…
Максимальная мощность, кВт (л.с.) / об….
Максимальный крутящий момент, Нм / об….
Рекомендуемое топливо

Максимальная скорость, км/ч
Время разгона 0-100 км/ч, с

Городской цикл, л/100 км
Загородный цикл, л/100 км
Смешанный цикл, л/100 км

Снаряженная масса, кг
Объем топливного бака, л
Технически допустимая максимальная масса,. ..
Максимальная масса прицепа без тормозной системы /…

Тип трансмиссии
Передаточное число главной…

Передняя
Задняя

Рулевой механизм

Фотографии

Экстерьер

Интерьер

LADA Granta в кузове седан – современный маневренный автомобиль, имеющий 4 двери и более просторный багажник, чем в лифт- и хэтчбек версиях. Стоимость базовой комплектации самая низкая, от 419 900р. По этим и другим причинам седан принимают за возможного фаворита линейки, купить и протестировать автомобиль покупатели могут уже с октября 2018 года в салонах дилера.

Внешний вид

Седан Лада Гранта после рестайлинга смотрится совершенно иначе: новой стала передняя часть, капот, рельеф багажника, молдинги в отдельных комплектациях. Появилась возможность заказать встраиваемые в зеркала повторители поворотов и ручки дверей в тон кузова. Обращая внимание на изменения в передней части:

Перерисованная решетка радиатора с серебристой каймой
Огни дневного света вписаны в ее верхние края
Форсунки с омывающей жидкостью перенесены на фартук лобового стекла
Зеркала стали шире и удобнее для обзора
Диски получили новый дизайн звезды с двойными лучами разной ширины

Салон автомобиля

В зависимости от комплектации, выбирается интерьер нового седана. Базовой функцией стала поддержка головы с помощью анатомических подголовников и спины, за счет боковых валиков. Водитель может отрегулировать сиденье по высоте. Свет в салоне гаснет с 25-секундной задержкой.

Центральная панель LADA Granta 2018 уютная и наглядная, все кнопки упорядочены, как и информация на многополосном дисплее. Имеется кнопка открытия багажника, вызова экстренных служб, с повышением комплектации добавляются переключатели, такие как климат-контроль или подогрев передних сидений.

Двигатели и комплектации

Представлены моторы, уже знакомые водителям по ранним комплектациям: 1.6 объем для 87-сильного, 98-сильного и самого мощного двигателя в линейке со 106 л.с. Обновленные поршни с выемками под клапаны позволяют работать тише и надежнее, избегая загиба при разрыве ГРМ. Двигатели демонстрируют резвость на низких оборотах, при этом их шум сглаживается за счет хорошей изоляции салона.

Седан представлен в пяти комплектациях: Standard, Classic, Comfort, Luxe и Prestige. В младшей из них доступен только двигатель 87 л.с. и механическая коробка передач, старшая предоставляет широкий выбор комфортных опций: гибридную коробку передач, более мощный мотор, подушку безопасности для переднего пассажира, ассистент парковки и старта на подъеме, а также другие опции из длинного списка.

Руководства по эксплуатации

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 26.10.20

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 16. 07.20

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 24.03.20

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 09.01.20

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 29.10.19

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 10.10.19

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 04.09.19

Дополнение к руководству по эксплуатации LADA Granta Drive Active от 01.07.19

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 13.03.19

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 05.10.18

Руководство по эксплуатации LADA Granta от 20.08.18

обозначения, ремонт, инструкция и тюнинг

В каждом автомобиле есть приборная панель, где сосредоточены основные приборы транспортного средства. Благодаря приборке водителю известно, с какой скоростью он едет, какое оборудование включено и какое состояние основных узлов автомобиля. В этом материале мы предлагаем вам узнать, что представляет собой панель приборов Лада Гранта, какие индикаторы на ней установлены и с какими неисправностями в ее работе можно столкнуться.

Содержание

[ Раскрыть]

[ Скрыть]

Описание и расположение индикаторов и приборов на панели

Обозначение индикаторов на щитке

Для начала ознакомимся с описанием, комбинация приборов Лада Гранта, схема которой приведена выше, включает в себя следующие компоненты:

Тахометр, этот датчик позволяет узнать, какова частота вращения коленвала в данный момент.
Лампочка неисправностей в работе системы управления ДВС.
Левый поворотник.
Датчик давления моторной жидкости в двигателе. Если он горит после запуска ДВС, необходимо проверить уровень масла в агрегате, если он слишком маленький, возможно, имеет место проблема утечки.
Индикатор антиблокировочной системы.
Лампочка штатной противоугонной системы — иммобилайзера. Этот узел предназначен для блокировки запуска мотора в случае несанкционированного проникновения в авто.
Индикатор перегрева антифриза в системе охлаждения, появляется в том случае, если температура двигателя достигнет 115 градусов.
Лампочка, которая включается, если блок управления зафиксировал аварийное состояние тормозной системы. Как правило, ее появление обусловлено недостатком тормозной жидкости в бачке.
Правый поворотник.
Индикатор разрядки аккумуляторной батареи.
Спидометр, стрелка которого соответствует скоростному режиму, с которым движется автомобиль. Датчик скорости, который выводит эту информацию на шкалу, монтируется на картере коробки передач.
Индикатор включения системы курсовой устойчивости.
Лампочка запрета включения повышенной передачи (как правило, не используется).
Этот индикатор появляется при активации дальнего освещения.
Символ включения задних противотуманок.
Лампа включения ближнего освещения.
Индикатор активации передних противотуманок.
Кнопка, предназначенная для сброса суточного километража.
Жидкокристаллический экран, где отображаются данные о последней поездке, в частности, километраж. В соответствии с тем, какая комплектация транспортного средства, данные, выводимые на экран, могут отличаться. В общем на дисплее может выводиться время, пробег, температура воздуха снаружи, опции бортового компьютера, объема топлива, а также информация в виде подсказок касательно переключения передач.
Индикатор не запертых дверей в машине.
Символ резервного остатка горючего в баке.
Этот индикатор появляется при недостаточном уровне давления в покрышках.
Сигнальная лампа работы ЭУР. Если она горит при запущенном двигателе, то скорей всего, в работе системы электроусилителя руля возникли проблемы.
Этот символ горит, когда ремни безопасности не пристегнуты.
Индикатор неисправностей двигателя, в большинстве случаев не используется.
Символ состояния подушек безопасности. Он всегда появляется после включения зажигания, поскольку производится режим тестирования системы. Если он продолжает гореть после запуска силового агрегата, это может свидетельствовать о неполадках в работе системы, поэтому необходимо обращаться в сервис. Если этот индикатор горит, то в случае аварии подушка либо не раскроется, либо она может раскрыться в неподходящий момент во время движения, что может быть еще хуже (автор — канал Лада Гранта Фан).

Возможные неисправности

Если с описанием все понятно, то перейдем к неисправностям. Как и любой другой электронный узел, панель приборов Лада Гранта также подвержена различным неисправностям.

Какие поломки могут произойти в работе контрольного щитка:

Приборка сломалась. При вышедшем из строя щитке симптомов может быть достаточно много. Например, откажутся работать только часть устройств или все. Если это так, то проблема в данном случае может заключаться либо в питании устройства, либо в его плате. Проблемы с ремонтом лучше доверить специалистам.
Приборка «глючит». Например, все двери закрыты, а индикатор незапертых дверей горит, либо оптика не включена, но на щитке мигает соответствующая лампочка. Как правило, в данном случае проблема заключается именно в плате (разумеется, если датчики рабочие). Если проблема в плате, то решить ее может прошивка приборной панели, но такой вариант помогает не всегда. Возможно, лампочки электрооборудования горят на щитке из-за вышедшего из строя датчика, поэтому не лишним будет проверить и его работоспособность.
Все приборы работают, но подсветка отсутствует. Если не работают сразу все лампочки подсветки, то скорей всего, проблема заключается в перегоревшем предохранителе или поврежденном проводе либо разъеме. Проверка проводки осуществляется с использованием мультиметра.
Не работает только часть лампочек или одна из них. В этом случае неисправность заключается в перегорании лампы, для ее устранения в Лада Гранта панель приборов демонтируется, после чего в ней меняются выгоревшие лампы.
Индикатор оборудования на приборке не включается. К примеру, вы включили дальний свет, а соответствующая лампочка не горит. Это может быть связано либо с выходом из строя самого индикатора (лампа меняется аналогичным образом), либо с поломкой датчика. Вполне возможно, что в приборке плохой контакт лампочки с проводкой.
Выход из строя спидометра. Причина неисправности может крыться в плате либо датчике скорости, установленном на приборке. Аналогично обстоит ситуация и с датчиками — уровня топлива, температуры мотора. Если они не работают или показывают неверные значения, то проблему следует искать в самих контроллерах, проводке или плате. Возможно, устройства не работают просто из-за плохого контакта.

Инструкция по демонтажу

Для демонтажа приборки необходимо следовать инструкции:

Сначала демонтируйте крышку блока с предохранителями, расположенного слева от руля.
Открутите три болта, фиксирующие пластиковую облицовку контрольного щитка.
Демонтируйте саму облицовку, после чего выкрутите еще четыре болтика приборки. Потяните ее на себя.
Далее, сожмите крепление штекера с проводами и отключите его от контрольного щитка.
Демонтируйте узел и произведите его ремонт или замену. Сборка осуществляется в обратной последовательности.

Видео «Идея для тюнинга приборки Гранты»

Как работает тюнингованный щиток для автомобиля Лада Гранта — смотрите на видео ниже (автор — Сергей Синяков).

Загрузка …

Была ли эта статья полезна?

Спасибо за Ваше мнение!

Статья была полезнаПожалуйста, поделитесь информацией с друзьями

Да (42.86%)

Нет (57.14%)

Органы управления Lada Granta

Всем привет сегодня рассмотрим органы управления на автомобиле Lada Granta. Конечно, профессиональным водителям данная статья не будет интересна, а вот новичкам или тем, кто только купил автомобиль Лада Гранта, возможно пригодится. Также из данной статьи узнаем все обозначения комбинации приборов. Итак, поехали!!!

Описание комбинации приборов Lada Granta

Тахометр Лада Гранта, показывает частоту вращения коленчатого вала двигателя, зона шкалы красного цвета означает опасный для двигателя режим работы.

Спидометр Лада Гранта, показывает с какой скоростью в данный момент движется автомобиль

Жидкокристаллический дисплей бортового компьютера Lada Granta, отображает информацию с Б.К

Обозначения приборов и указатели на дисплее Lada Granta

1. Сигнализатор аварийного низкого давления масла, включается красным цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы при работающем двигателе и постоянный (в течении 5.с) сигнал зуммера указывают на недостаточное давление масла в системе

2. Сигнализатор состояния анти блокировочной системы тормозов ABS (в вариантном исполнении), включается оранжевым цветом при включении зажигания и через 2с. после запуска двигателя гаснет, горение лампы в остальных случаях свидетельствует о неисправности системы, которую следует устранить в специализированной станции ТО

3. Сигнализатор аварийного состояния тормозной системы, включается красным цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы и сигнал зуммера (5 включений) при работающем двигателе свидетельствуют о падении уровня тормозной жидкости ниже метки «MIN» в бачке главного цилиндра, эксплуатировать автомобиль с горящим индикатором запрещено

4. Сигнализатор неисправности системы управления двигателем (Check Engine), включается оранжевым цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы после пуска двигателя или во время движения указывает на выход из строя кого-либо элемента системы управления двигателем (не означает, что двигатель должен быть немедленно остановлен, тем не менее причину следует устранить как можно скорее), определить ошибку можно используя диагностический разъем

5. Сигнализатор перегрева охлаждающей жидкости, включается красным цветом при включении зажигания и через 5с. после запуска двигателя гаснет, звуковой сигнал указывает на перегрев двигателя (t>115C), сигнал будет повторяться пока температура не опустится ниже 110C, при включении сигнализатора эксплуатировать автомобиль запрещено, в противном случае это приведет к серьезной поломке двигателя

6. Сигнализатор зарядки аккумулятора, включается красным цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы или горение в пол накала во время работы двигателя указывает на отсутствие зарядного тока из-за неисправности генератора или регулятора напряжения, а также слабым напряжением (или обрывом) ремня привода генератора, эксплуатация автомобиля с горящим индикатором запрещено

Комбинация приборов описание и обозначения значков Lada Granta

1. Сигнализатор состояния подушки безопасности, включается оранжевым цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы в других случаях указывает на неисправность системы, необходимо как можно скорее обратиться в сервис, т.к. помимо отказа в аварийной ситуации, подушка может неожиданно раскрыться

2. Сигнализатор неисправности силового агрегата (не используется)

3. Сигнализатор недостаточного давления в шинах, загорается при при падении давления в шинах

4. Аварийная сигнализация

5. Сигнализатор не пристегнутого ремня безопасности водителя, загорается при включении зажигании, если не пристегнут ремень безопасности

6. Сигнализатор состояния электро усилителя рулевого управления (подключен в вариантном исполнении), включается оранжевым цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы во время работы двигателя указывает на неисправность ЭУР, которую необходимо как можно скорее устранить

7. Сигнализатор резервного остатка топлива, указывает на необходимость дозаправки автомобиля, не допускайте полной выработки бензина, т.к. это может привести к поломке топливного насоса

8. Сигнализатор незакрытых дверей, загорается красным светом если открыта дверь

9. Сигнализатор режима иммобилайзера, загорается оранжевым светом и отображает состояние иммобилизатора и режима охраны автомобиля

10. Жидкокристаллический дисплей бортового компьютера, отображает информацию с БК

11. Кнопка сброса показаний счетчика суточного пробега, нажатием на кнопку устанавливают на 0 счетчик суточного пробега в жидкокристаллическом дисплее или выбирают режимы показа суточного или общего пробега

12. Сигнализатор включения ближнего света фар, указывает на включение ближнего света фар

13. Сигнализатор режима работы системы курсовой устойчивости (ESC) (в вариантном исполнении), включается желтым цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы «ESC OFF» свидетельствует об отключении системы, а горение и мигание во время движения указывает на срабатывание системы курсовой устойчивости, в остальных случаях горение лампы свидетельствует о неисправности системы

14. Сигнализатор режима работы системы курсовой устойчивости (ESC) (в вариантном исполнении), включается желтым цветом при включении зажигания и после запуска двигателя гаснет, горение лампы «ESC OFF» свидетельствует об отключении системы, а горение и мигание во время движения указывает на срабатывание системы курсовой устойчивости, в остальных случаях горение лампы свидетельствует о неисправности системы

15. Сигнализатор запрета перехода на высшую передачу «О/D OFF» (не используется)

16. Сигнализатор включения дальнего света фар, указывает на включение дальнего света фар

Лампы указателей поворота — включаются при включении указателя поворота Лада Гранта

Бортовой компьютер Лада Гранта

1. Отображает текущее время или (в вариантном исполнении) режим индикации подсказки переключения передач, а также режим индикации работы АКПП

2. Отображает по выбору общий или суточный пробег

3. Отображает температуру наружного воздуха или (в вариантном исполнении) функции бортового компьютера

4. Отображает уровень топлива

Руль Лада Гранта

На руле лада гранта имеется кнопка звукового сигнала. Для того чтобы включить звуковой сигнал, нажмите на любое место центральной накладки рулевого колеса.

Руль на Гранте регулируется по высоте с помощью рычага под рулём.

Внимание руль можно регулировать только при полной остановке автомобиля.

Переключатели и рычаги под рулём

Правый под рулевой переключатель отвечает за очиститель и омыватель стёкол. Переключатель включает электрические цепи при включенном зажигании. Рычаг переключателя можно перевести в следующие положения

0 — стеклоочиститель и омыватель выключены

1 — включен прерывистый режим работы стеклоочистителя (нефиксированное положение)

2 — включен прерывистый режим работы стеклоочистителя (фиксированное положение). В прерывистом режиме работы щетки стеклоочистителя совершают один ход через равные промежутки времени в несколько секунд независимо от наличия капель на ветровом стекле (в вариантном исполнении устанавливают систему автоматического управления стеклоочистителем

3 — включена малая скорость стеклоочистителя

4 — включена большая скорость стеклоочистителя

5 — перемещением рычага на себя включен омыватель ветрового стекла (не фиксированное положение)

Кнопки на под рулевом переключателе

Для переключения между режимами индикации и управления функциями используются клавиши на рычаге под рулевого переключателя стеклоочистителя и омывателя. При нажатии на верхнюю стрелку клавиши Б включаются режим выбора функций бортового маршрутного компьютера «по кольцу» вперед, выбор минут в режиме установки времени.

При нажатии на нижнюю стрелку клавиши Б включаются режим выбора функций бортового маршрутного компьютера «по кольцу» назад, выбор часов в режиме установки времени. Для обнуления установленных параметров нажмите и удерживайте кнопку A («RESET») более трех секунд.

Левый под рулевой переключатель отвечает за включение и выключение дальнего света фар а так же за моргание дальним светом. Также левый переключатель служит включением и выключением поворотников.

Для того чтобы включить левый поворотник рычаг нужно опустить вниз. Чтобы включить правый то на верх.

Для того чтобы включить дальний свет фар нужно под рулевой рычаг нажать как бы от себя стоит помнить дальний свет включится только в том случае если у вас включен ближний свет фар. Чтобы поморгать дальним светом нужно переключатель дергать, как бы на себя работает вне зависимости включено у вас зажигание или нет.

Стоит отметить после того как включается ближний габариты или дальний на комбинации приборов загораются специальные сигнализирующие значки.

Вещевой ящик

Для того чтобы открыть крышку ящика, потяните ручку на себя

Прикуриватель Lada Granta

Для пользования прикуривателем нажмите на кнопку его подвижной части. После нагрева спирали примерно в течение 10-20 с подвижная часть прикуривателя автоматически со щелчком вернется в исходное положение — прикуриватель можно извлечь для использования.

Внимание!!!

В вариантном исполнении автомобиля Лада Гранта вместо прикуривателя может быть установлено гнездо розетки для подключения дополнительных 12-вольтовых электрических приборов мощностью не более 120 Вт.

Подстаканники

Рычаг переключения передач

На рукоятке рычага нанесена схема переключения передач. Заднюю передачу надо включать только после полной остановки автомобиля.

Ручник Lada Granta

Чтобы включить стояночный тормоз, поднимите рычаг до упора вверх (при правильно отрегулированном тормозе не более 8 щелчков). При этом загорится красным светом контрольная лампа в комбинации приборов.

Чтобы выключить стояночный тормоз на Гранте, немного потяните рычаг вверх, нажмите на кнопку на торце рукоятки рычага и опустите его до упора вниз.

Блок управления наружным освещением Lada Granta

Блок управления фарами на автомобиле ГРАНТА находится слева под воздуховодом. Для того чтобы включить габариты нужно переключатель установить в среднее положение. Габариты будут работать, вне зависимости включено у вас зажигание или нет.

Для того чтобы включить ближний свет фар на Lada Granta нужно переключатель переместить в самое правое положение работает при включённом зажигании. Если в таком состояние выключить зажигание, то останутся гореть только габаритные огни.

Сопла системы вентиляции и отопления салона

Сопла предназначены для регулировки потока воздуха из системы отопления, кондиционирования и вентиляции. Поток воздуха регулируют перемещением дефлекторов сопел, а направление потока воздуха — поворотом дефлекторов в соответствующую сторону.

Выключатель аварийной сигнализации

При нажатии на клавишу выключателя загораются мигающим светом все указатели поворота и сигнализатор, установленный в клавише. При повторном нажатии на клавишу сигнализация отключается.

Замок зажигания

Замок зажигания, объединенный с противоугонным устройством, расположен с правой стороны рулевой колонки. Ключ в замке зажигания может занимать одно из трех положений

— 0 (выключено) — положение фиксированное, ключ из замка зажигания вынимается. При вынутом ключе срабатывает запирающий механизм противоугонного устройства. Для гарантированной блокировки вала рулевого управления поверните рулевое колесо вправо или влево до щелчка. Для выключения механического противоугонного устройства вставьте ключ в выключатель (замок) зажигания и, слегка поворачивая рулевое колесо вправо-влево, поверните ключ в положение «I»
— I (зажигание) — положение фиксированное, включено зажигание, ключ из замка зажигания не вынимается, рулевое управление разблокировано
— II (стартер) — положение не фиксированное, ключ из замка зажигания не вынимается, рулевое управление разблокировано. Это положение достигается поворотом ключа зажигания по часовой стрелке с преодолением усилия пружины. Для работы стартера удерживайте ключ зажигания рукой. Выключатель зажигания оборудован блокировкой повторного включения стартера при работающем двигателе. Для повторного включения стартера после неудачной попытки пуска двигателя переведите ключ из положения «I» в положение «0», а затем вновь в положение «II»

Внимание!!!
Не удерживайте ключ зажигания в положении «II» более десяти секунд.
Категорически запрещается выключать зажигание и вынимать ключ из замка зажигания во время движения, так как это приведет к резкому увеличению усилия на педали тормоза и блокировке рулевого управления.

Если зажигание выключено, а ключ оставлен в замке зажигания, то при открывании двери водителя зуммер издает непрерывную трель, предупреждая об оставленном в замке зажигания ключе.

Блок управления системой отопления и вентиляции на автомобиле Лада Гранта ВАЗ 2190

— переключатель режимов работы вентилятора

— регулятор температуры подаваемого в салон воздуха;

— блок кнопочных выключателей;

— регулятор распределения потоков подаваемого в салон воздуха;

— рычаг управления системой рециркуляции

Блок кнопочных выключателей

В зависимости от комплектации в блоке устанавливают следующие выключатели
— выключатель электрообогрева ветрового стекла
— выключатель обогрева заднего стекла. Обогреватель заднего стекла работает только при установке ключа в выключателе зажигания в положение «I». При нажатии на клавишу выключателя включается обогрев заднего стекла и в клавише загорается сигнализатор. При повторном нажатии обогрев выключается. При повороте ключа в выключателе зажигания в положение «0» при включенном обогревателе функция обогрева отключается. При повторном пуске двигателя функция обогрева восстанавливается без дополнительного нажатия на клавишу выключателя. Сигнализатор, расположенный на клавише выключателя, будет гореть желтым светом в течение всего времени работы обогревателя

Гидрокорректор фар

Гидрокорректор фар служит для корректировки направления пучка света фар в зависимости от загрузки автомобиля.

Задние противотуманные фонари

Выключатель задних противотуманных фар. За включение и выключение отвечает выключатель справа, при работающем ближнем свете. Нажав переключатель первый раз, противотуманки включаться, повторное нажатие отменяет работу противотуманных фар.

Выключатель передних противотуманок, только при наличии . Для их включения нажимается клавиша слева, также при включенном габаритном освещении. Повторным нажатием отключаются передние противотуманные фары.

Боковые двери Lada Granta

Чтобы открыть дверь изнутри, потяните ручку 1 на себя.
Чтобы открыть или закрыть окно используется ручка под номером 3
Ручка двери под номером 2

Для блокировки двери изнутри нажмите на кнопку блокировки. Чтобы разблокировать замок, вытяните кнопку.

Заднюю дверь можно заблокировать, нажав на кнопку блокировки при открытой двери и захлопнув ее. Передние двери таким образом заблокировать нельзя, так как при открытой двери кнопка блокировки не опускается.
Чтобы дети по неосторожности не открыли задние двери на ходу, нажмите вниз рычажок детского замка и захлопните дверь. Теперь дверь можно открыть только снаружи.

Как открыть капот Lada Granta

Для того чтобы открыть капот на Ладе Гранте нужно дёрнуть рычаг который находится слева под панелью приборов. После просуньте руку под капот чуть левее середины, нажмите снизу вверх на рычаг предохранительного крючка и поднимите капот. Выньте упор из зажимов на передней части автомобиля, удерживая капот. Поднимите упор и вставьте его загнутый конец в отверстие на внутренней стороне капота. Чтобы закрыть капот, выньте конец упора из отверстия, слегка приподняв капот. Опустите упор и зафиксируйте его в зажимах. Осторожно опустите капот, при этом защелкнется предохранительный крючок. Надавите на капот возле замка до щелчка.

Как отрегулировать передние сиденья

Перед поездкой отрегулируйте положение сиденья так, чтобы чувствовать себя за рулем комфортно. Неудобная посадка повышает утомляемость, что может негативно повлиять на безопасность движения. Передние сиденья регулируются в продольном направлении (вперед-назад), по углу наклона спинки и по высоте подголовников.Правильным считается регулировка сиденья, когда выпрямленная левая нога всей стопой опирается на пол под педалью сцепления, а руки, слегка согнутые в локтях, лежат на рулевом колесе в положении “без 10 минут 2 часа”. Сядьте на сиденье и проверьте, насколько удобно сидеть за рулем.

Если надо отрегулировать наклон спинки сиденья, поверните ручку шарнира. Спинка поднимается или опускается при вращении ручки в соответствующую сторону.

Если надо передвинуть сиденье вперед или назад, поднимите ручку которая находится под сиденьем и передвиньтесь вместе с сиденьем в нужном направлении, после чего отпустите ручку. Слегка подвиньтесь вперед-назад, чтобы сиденье зафиксировалось в выбранном положении.

Чтобы отрегулировать подголовник по высоте, поднимите его вверх или опустите вниз. Пружинные зажимы удержат подголовник в выбранном положении.

Ремни безопасности

Чтобы пристегнуть ремень, плавно вытяните его и вставьте язычок в замок до щелчка.
Ремень не должен перекручиваться
Чтобы отстегнуть ремень, нажмите на кнопку замка

Лючок и крышка бензобака Лада Гранта

что улучшили, а что упростили?

В результате прошлогоднего рестайлинга «Лада Калина» получила новый дизайн и новое имя — хэтчбек и универсал стали частью семейства «Гранта». Про саму обновлённую «Гранту» написано уже немало, а почему бы не ставнить её с «Калиной»? Попробуем и узнаем, что и в какую сторону поменялось в популярном «бюджетнике».

У нас на тесте — хэтчбек «Лада Калина» 2013 года и седан «Лада Гранта» 2018 года. Дизайн, с одной стороны, сделал шаг вперёд, породнив народный автомобиль с последними моделями «Лады» — «Вестой» и «Иксреем», с другой стороны, начисто стёр индивидуальность. Но это дело субъективное, а вот утраченный «четырёхглазый» головной свет — это объективная и не очень радостная реальность.

Понятно, что фары «Гранты» светят в пределах всех норм, иначе они вообще не появились бы в таком виде, однако комбинация ламп H7 и h2 для ближнего и дальнего света работает куда лучше одинокой h29, которую, к тому же, и в продаже найти сложнее, чем привычную h5. К слову, и регулируется уровень сейчас гидрокорректором. Бюджетно, в соответствии с позиционированием. Напомню, на «Калине» был электрический корректор.

В работе замков дверей по ощущениям за пять лет мало что изменилось, а вот фиксаторы разные. У старых фиксация в промежуточных положениях относительно слабая, зато положений на одно больше, чем у новых, которые очень хорошо держат дверь, да ещё и при закрывании притворяются своего рода доводчиками. С первыми может застать врасплох ветер, лихо распахивающий приоткрытую дверь, а со вторыми лучше не привозить незнакомых пассажиров на тесные парковки, ведь стоит чуть замешкаться при открывании, и дверь уже распахнута до единственного промежуточного положения. А ведь борт соседней машины может оказаться так близко…

По удобству на водительском кресле на победу сразу же напрашивается «Гранта». Есть регулировка по высоте (которая, кстати, какое-то время была, потом пропала, потом снова появилась), подушка поплотнее, а обивка не собирает на себя всю пыль, волосы, перья из пуховиков.

Единственное, в чём отыгралась «Калина» — подголовник с регулировкой не только вверх-вниз, но и вперёд-назад. Эта особенность продержалась относительно недолго, и ушла ещё в бытность «Калины» вместе со сменой поставщика сидений.

Передняя панель всех версий обновлённой машины перекочевала из базовых комплектаций предшественницы, обзаведясь новым декором, в том числе весьма похожим на металл. Так что мультимедийной системы с возможностями «вшивания» продвинутого бортового компьютера и подключения камеры заднего вида теперь ей не положено. Зато на месте дисплея всегда есть отсек с крышкой.

Лада Калина

Лада Гранта

Руль абсолютно одинаковый, за исключением эмблемы, но комбинации приборов разные. И тут снова раунд за «Грантой». Приятная белая подсветка загорается с включением зажигания, на вспомогательном экране белые символы на чёрном фоне, а не наоборот, риски на шкалах ясные и чёткие, цифры крупные. Хоть оцифровка и радиальная, она считывается лучше, чем на «Калине» с её горизонтальными, но мелкими, цифрами и частоколом рисок.

Лада Калина

Лада Гранта

Комплектации за время выпуска «Калины» и «Гранты» не раз претерпевали изменения (на время появлялись, например, круиз-контроль и навигация). Круиза не тестовой «Гранте» нет, но в список опций его совсем недавно вернули. О возвращении навигации ничего не слышно… Ну а если говорить о тестовых автомобилях, то новинку кроме мультимедийной системы обделили очечником, подстаканником за рычагом стояночного тормоза, функцией автоматического запирания замков в движении.

Бонусы тоже есть, но с оговоркой. Обогрев лобового стекла, задние датчики парковки, система стабилизации и литые колёса на 15 дюймов – вещи, конечно, интересные, но они были и у «Калины» в 2013 году в топовой комплектации.

На работающей машине сразу понятно, что «шумка» стала лучше. Один из внешних признаков – фетровые подкрылки «по кругу». На педалях ощущения очень похожие на «калиновские», ходы рычага коробки передач стали короче, а включение чётче. Всё очень позитивно до тех пор, пока не начнёшь рулить. «Старушке» кроме чуть размазанного «нуля» и предъявить особо нечего, в целом ощущения такие, будто у неё просто легко крутить руль, а усилителя нет вообще, настолько прозрачно чувствуется машина.

Про новую «Гранту» такого не скажешь. Усилие стало меньше, но при этом оно нарастает не в зависимости от угла поворота руля, а как-то хаотично, да ещё и информации практически никакой. Да, новый усилитель появился на «Гранте» задолго до рестайлинга, но мы сравниваем две конкретные машины. И стоит сказать, что и в «Калине» всё не настолько великолепно, и в «Гранте» всё не настолько плохо. Просто между ними есть очень заметная разница.

Зато новая машина преуспела в традиционной для российских машин дисциплине — езде по неровным дорогам. Энергоёмкость шикарная, подвеска успешно глотает кочки самых разных калибров и не поперхнётся. При этом и раскачки не наблюдается.

«Калина» в этом плане послабее, даже со скидкой на возраст и пробег. Она изначально была чуть более расслабленной. Но есть и плюс: на мелочи она мягче, чему дополнительно способствуют 14-дюймовые колёса с более высоким профилем. Ну а нынешняя подвеска, как и усилитель, появилась между годами выпуска тестовых автомобилей, только в этот раз сначала на «Калине», в 2014 году.

Как воспринимать то, что произошло с машиной за эти годы? Хороший вопрос. С одной стороны, некоторые вещи упростили (заметнее всего по головному свету и усилителю руля). Кроме того, начальные и средние комплектации «Гранты» куда беднее аналогичных «калиновских». С другой стороны, эта нарочитая «бюджетность» видна только по сравнению с «Калиной», а «Гранта» всегда была такой — попроще и подешевле. И покупали её всегда куда лучше. Так что с точки зрения рынка всё сделано правильно…

Размер и количество присужденных грантов Black Fret

Грантов, направленных сообществом Black Fret, присуждаются на основе артистического мастерства музыкантам, выбранным в процессе отбора исполнителей. Художники, отобранные в календарном году, получают право на получение грантовых средств в течение следующего календарного года, участвуя в программе Black Fret Artist.

По мере нашего роста Black Fret надеется предоставить дополнительные программы, предлагающие финансирование артистам, которые будут использовать разнообразный набор критериев отбора.

Размер гранта ($)
Сумма в долларах индивидуального гранта, выплачиваемого артисту Black Fret, ежегодно устанавливается Советом директоров на основе отзывов местных артистов о расходах, связанных с созданием и исполнением их работ. 2017 Black Fret Artists получили либо крупный грант в размере 17000 долларов США, либо незначительный грант в размере 5000 долларов США. Мы ожидаем, что основные гранты вырастут до 25 000 долларов по мере того, как мы достигнем предела количества участников.

Количество грантов
Когда мы увеличим размер гранта до 25 000 долларов, наша цель смещается в сторону увеличения количества грантов, которые мы выделяем каждый год.Наша цель — иметь возможность стабильно финансировать длинный список местных музыкантов.

Управление
В целях обеспечения использования средств на благотворительную миссию Black Fret артистам будут выплачиваться гранты после завершения отдельных этапов в процессе создания и исполнения новой музыки и предоставления общественных работ. Художники могут выбрать из меню результатов, чтобы выполнить это требование о финансировании. Например, Артист может получить до 1500 долларов за каждую новую песню, выполнив и продемонстрировав три отдельных этапа творческого процесса: 1) Написание: 300 долларов за отправку нового текста песни и демо-записи; 2) Запись: 700 долларов за выставление счета от уважаемой сторонней студии звукозаписи или звукорежиссера; и (3) Релиз: 500 долларов за выпуск новой песни для публики.

Художники могут разблокировать 60% своего гранта до 30 июня, а остальные 40% — во второй половине года.

$ 25000 Жертвовать HAAM в ответ на COVID-19

Первые два примера этих потрясающих концертов зрители могут увидеть онлайн на канале Black Fret на YouTube и в плейлисте Love and Lightstream 2020. Невероятный набор из шести песен исполнителя Black Fret 2019 Ley Line можно увидеть целиком. Зрители также могут просмотреть последнюю песню, сыгранную на мероприятии Love and Lightstream, «Scar Tissue» группы Black Fret Artist Trouble in the Streets 2018.

«То, что Scholz будет единственной живой сценой в Остине в течение недели, где должны были быть сотни выступлений в день, было одновременно странным и унизительным», — сказал Daniel Northcutt, оператор Scholz Garten . «Мы знали, что должны поддерживать музыку, но должны были делать это безопасно и ответственно. Все команды объединились, чтобы социально дистанцироваться, прикрываться и поддерживать музыку. Мы очень рады, что эти группы вернутся на сцену с живой публикой как можно скорее.”

В ответ на кризис Scholz Garten также делает возможным онлайн-заказы. Остинцы могут взять себе горячую еду, холодное пиво и важные продукты питания у обочины. Шольц пожертвует 20% всех приготовленных и горячих блюд и пикапов на обочине, пока все рестораны, бары и заведения не станут общедоступными. Заказы можно разместить по электронной почте здесь.

«Black Fret стремится поддерживать нашу местную музыку, и мы благодарим всех: наших членов, спонсоров, Консультативный совет, волонтеров и общественность, которые поддерживают нас каждый день», — сказал Отт.«Прежде всего, мы благодарим музыкантов, которые все еще создают невероятную музыку каждый день, несмотря на этот кризис. Знайте, что мы здесь для вас сейчас и будем там лично подбадривать вас, как только сможем ».

Black Fret также рада объявить о запуске своего сезона прослушивания 2020 года, в котором будет представлено не менее 20 онлайн-выступлений от номинантов 2020 года до участников Black Fret. Эти выступления будут сопровождаться специальными предложениями из местных ресторанов, предложат фирменные напитки и предоставят участникам Black Fret возможность познакомиться с классом номинантов 2020 года, возможно, даже больше, чем на традиционных личных мероприятиях.Эти онлайн-мероприятия будут доступны для участников Black Fret как в Остине, так и в Сиэтле.

Те, кто заинтересован в том, чтобы присоединиться к Black Fret и поддержать музыку, которая делает наши города яркими и динамичными местами для жизни, могут сделать это здесь: Присоединяйтесь к Black Fret. Узнайте больше о Black Fret здесь: About Black Fret.

Black Fret награждает 220 000 долларов грантами 20 Austin Band на распроданном гала-вечере Black Ball

(ОСТИН, ТЕХАС — 16 декабря) — Остинская некоммерческая организация Black Fret выделила 220 000 долларов на третьем ежегодном гала-концерте Black Ball в The Paramount Theater в субботу, декабря.10, где его получатели грантов на 2016 год были объявлены перед распроданным домом, в котором приняли участие более 1100 человек. Десять основных получателей гранта получили грант в размере 17 000 долларов США каждый.

Эти художники включают в себя: Би Кейвс, Карсон МакХоун, Дэн Дайер, Накия, Рэй Прим, Сюзанна Чоффель, «Плавание с медведями», братья Петерсон, Уокер Люкенс и Венди Колонна. Кроме того, десять малых получателей гранта получили грант в размере 5000 долларов США каждый. Эти исполнители включают Brownout, Calliope Musicals, Dana Falconberry, Daniel Eyes & The Vibes, Golden Dawn Arkestra, Harvest Thieves, Leopold and His Fiction, Magna Carda, Sweet Spirit и The Name Sayers.В течение всего вечера с презентациями грантов выступили несколько спонсоров и участников Black Fret, а также мэр Остина Стив Адлер, страстный сторонник музыки Остина.

С 2014 года Black Fret предоставил местным остинским музыкантам гранты на сумму более полумиллиона долларов. Эти гранты использовались Black Fret Artists для создания и исполнения музыки, в том числе 142 новых песен, 110 студийных записей, 56 новых песен и видеороликов, 214 выступлений в США, 28 международных выступлений и 58 общественных работ для других местных благотворительных организаций.Только в этом году Black Fret освещался в национальных СМИ, таких как Pitchfork (статья здесь) и Forbes (статья здесь), и набирает обороты для того, что в конечном итоге может привести к выходу на другие рынки в Америке.

«Я все еще жду, когда Канье появится у моей двери и скажет, что Бейонсе заслуживает этого гранта», — сказал получатель гранта Рэй Прим. «Серьезно, на самом деле, я занимаюсь музыкой в Остине с 1992 года, и это лучшее, что со мной когда-либо случалось.С первого выступления Black Fret, которое мы отыграли в Scottish Rite Theater, я знал, что эта организация особенная. Один из участников работал в клубе, в который мы пытались попасть, и видел, как мы играли той ночью… и вот так мы играем там в течение двух недель. Снес мой разум. Прежде чем меня забрали, я составил список желаний, потому что не знал, сколько еще я собираюсь продолжать, и нуждался в чем-то, что могло бы меня мотивировать. В течение 11 месяцев Black Fret отметили шесть пунктов… играя The Paramount, входя в тройку лучших.Мэтт, Колин и вся команда посланны небесами, и я бы принял за них пулю … ну … я не знал о пуле, у меня аллергия, но что бы еще им ни понадобилось, я там. Black Fret — настоящее дело ».

«Нам сказали, что несколько долларов, отданных артисту сегодня, могут однажды привести к созданию чьего-то любимого фильма или песни, которая спасет чью-то жизнь», — сказал получатель гранта Bee Caves. «Нам очень повезло, что нас пригласили присоединиться к семье Black Fret, и мы очень ценим любовь и уважение, которые они нам оказали.Финансовая поддержка Black Fret станет для нас прочной основой для продолжения творчества и погони за этой нелепой мечтой. «Спасибо» недостаточно ».

«Почувствовать любовь к Austin Music в Paramount, когда мы наградили 220 000 долларов в этом году группе артистов Black Fret, было потрясающим опытом, — сказал Мэтт Отт, соучредитель Black Fret. «Для меня большая честь стоять на этой сцене, пока такие невероятные таланты получают гранты. Мы чрезвычайно рады продолжить создание этого сообщества поддержки, поскольку мы начинаем сезон 2017 года в январе.21. ”

The Black Ball спонсировался титульным спонсором Dell Inc., а также Deloitte Consulting, SunPower Inc., GSD & M, NY Life, Whole Foods Market и Personify. Медиа-спонсоры включают KUTX Music 98.9, Austin Monthly, The Austin Chronicle, CultureMap и Do512.

«То, что Dell станет нашим первым титульным спонсором Black Ball, — это большой вотум доверия со стороны лидеров нашего корпоративного сообщества», — сказал основатель Black Fret Колин Кендрик. «Благодаря тому, что Deloitte, GSD & M, партнер NY Life Эрик Энг, Sunpower, Whole Foods и Personify выступили в качестве спонсора этого мероприятия, мы смогли наградить наших артистов Black Fret 2016 еще больше.”

Помимо грантов, все номинанты Black Fret имеют постоянный доступ к наставничеству со стороны Консультативного совета Black Fret, в который входят 37 ведущих лидеров музыкальной индустрии Остина. Среди недавно добавленных советников — Коди Аллен, Эван Блан, Джен Далтон, Дэнни Гиллеспи, Лейн Лауритцен, Майкл Рамос, Дик Ривз, Крис «Френчи» Смит и Грэм Уильямс. Существующие консультанты: Марк Аддисон, Хизер Олден, Рогги Бэр, Пэт Кэссиди, Рини Коллинз, Майк Кроули, Уоффорд Дениус, Си Джей Эйрикссон, Джим Ино, Найджел Финли, Уилл Хоффман, Дженнифер Хулихан, Террани Джонсон, Терри Ликона, Уэстон МакЛарти, Дэвис МакЛарти. , Марша Милам, Мэтт Новески, Тим Палмер, Джордж Райфф, Питер Шварц, Карлос Соса, Джо Сталлоне, Стюарт Салливан, Хизер Вагнер Рид, Кевин Уоммак, Том Вейл и Расти Загст.Для получения дополнительной информации посетите www.blackfret.org/advisors.

«Они взяли нас с распростертыми объятиями», — сказал получатель гранта Леопольд и его произведения. «Black Fret, как и Остин, — очень редкое музыкальное сообщество, желающее успеха всем участникам. Это обнадеживает, и нам очень повезло быть частью его будущего ».

«Я хотел бы выразить свою глубокую признательность людям из Black Fret, которые много думали, много времени и денег уделяли организации. Для меня большая честь принять грант и с гордостью сказать, что в моем родном городе существует такое поддерживающее сообщество, — сказал получатель гранта Карсон МакХоун.

Black Fret получает постоянную поддержку от щедрых спонсоров, таких как ALL ATX, Dell Inc., Deloitte Consulting, SunPower Inc., Gibson Brands, Департамент экономического развития города Остина — отдел музыки и развлечений, GSD & M, Personify, Whole Foods, DeMaris Entertainment. , Juice Consulting, Nomad Sound, Прочая аренда, KUTX, Austin Monthly, The Austin Chronicle, Austinot, Paramount Theater, Biggs Electric, Предприимчивые люди, Водка ручной работы Тито, Ben E.Кейт Дистрибьютор, Барбекю Каунти Лайн, Шейди Гроув и Фрэнк.

О Черном ладу:

Основанная в 2013 году, Black Fret — это общественная благотворительная организация со штаб-квартирой в Остине, миссия которой — дать музыкантам возможность создавать и исполнять отличную новую музыку. Организация представляет собой новаторское развитие старой модели патронажа симфонических оркестров, ориентированной на поддержку популярной местной музыки. Вместе ограниченное членство Black Fret создаст благотворительную организацию, способную предоставлять более миллиона долларов в год в виде грантов артистам Остина.Ежегодные членские взносы Black Fret составляют 1500 долларов, а после уплаты налогов — примерно до 100 долларов в месяц. Многие участники имеют доступ к программе корпоративных благотворительных пожертвований (например, предлагаемой Dell, Apple и другими крупными работодателями), которая может снизить ежемесячные расходы до менее чем 50 долларов в месяц.

В обмен на ежегодные взносы участники будут вознаграждены беспрецедентным личным доступом к лучшим артистам города через широкий спектр частных мероприятий, включая ежемесячные шоу в уютных местах и невероятное ежегодное гала-мероприятие под названием «Черный бал».Получатели грантов выбираются ежегодно в течение года, когда участники, советники и предыдущие получатели грантов номинируют, лоббируют, смотрят выступления и, наконец, голосуют за своих любимых артистов. Те, кто желает стать участником Black Fret, могут зарегистрироваться на сайте www.blackfret.org/join. Все членства обеспечивают вход для участника и гостя на все предстоящие мероприятия Black Fret 2017 года, включая Black Ball. По вопросам обращайтесь по электронной почте[email protected], а для получения дополнительной информации посетите www.blackfret.org.

Примечание для СМИ:
Для запросов прессы, освещения событий или для ответа на вопрос о будущем мероприятии Black Fret, пожалуйста, свяжитесь с командой Juice Consulting:

Хизер Вагнер Рид Эмбер ЛаФранс
713 208 3891 469 877 1533
[email protected] [email protected]

Black Fret помогает музыкантам в Остине и за его пределами

Заработать на жизнь в качестве музыканта может быть особенно сложно во времена консолидации лейблов, падения продаж и потоковых сервисов, но это никогда не было легко.Люди, которые исполняют и записывают музыку, вносят огромный вклад в культуру своего региона, но редко получают вознаграждение, которое отражает их вклад. Но двое мужчин из Остина, штат Техас, пытаются изменить это, привнося в местную популярную музыку модель патронажа в симфоническом стиле.

Мэтт Отт и Колин Кендрик — соучредители Black Fret, организации, чья миссия — «дать музыкантам возможность создавать и исполнять отличную новую музыку». У них есть патронажная модель, при которой члены организации вкладывают 1500 долларов и, в свою очередь, имеют право голоса в предоставлении значительных грантов своим любимым местным музыкантам.В прошлом году группа выдала гранты на сумму 150 000 долларов, а в декабре этого года надеется получить еще больше на своем ежегодном гала-мероприятии под названием «Черный шар».

Я позвонил Отту и Кендрику, чтобы узнать подробности об их организации и о том, как, по их мнению, она может изменить жизнь не только в Остине, но и для музыкантов по всей стране. Наш разговор был слегка отредактирован для ясности и продолжительности.

Шон Сетаро: Можете ли вы рассказать мне о своем личном опыте в музыке и благотворительности?

Колин Кендрик: Мы с Мэттом дружим с 14 лет.Мы выросли в Остине в окружении музыкальной индустрии здесь, в городе. Многие наши друзья играли музыку в клубах. У нас совсем не было таланта, но мы испытывали невероятную страсть к музыкальной сцене здесь, в Остине, и воочию наблюдали, что она делает с нашими друзьями — успехами и неудачами, горестями, увеселениями.

Пробыв здесь всю жизнь, мы хорошо осведомлены о том, что произошло с музыкальной индустрией за последние 20 лет. Я закончил бакалавриат по аудиотехнике. Я работал в телешоу Austin City Limits , где я начал думать о создании чего-то вроде симфонии или оперы, но популярного.Мы с Мэттом вместе с другим нашим приятелем основали Austin Music Foundation, благотворительную организацию, которая предоставляет бизнес-наставничество и обучение местным группам здесь, в городе. Black Fret — это эволюция этого. После обучения и наставничества групп мы поняли, что у нас есть высший эшелон художественного мастерства, что даже с такими навыками этим людям нужна финансовая поддержка — так сказать, начальный капитал.

Мэтт Отт: Я живу в Остине, штат Техас, с 1978 года.У нас не только большая страсть к музыке, но и большая страсть к тому, что музыка делает для нашего города. Люди часто замечают, что приехать в Остин и не насладиться живой музыкой — все равно что поехать в Нью-Йорк и не насладиться пивом или поехать в Калифорнию и не пить вино. Это часть того, кто был. Хранить здесь музыку как поистине яркую заботу близко и дорого моему сердцу.

Setaro: Вы можете объяснить, как работает Black Fret?

Отт: Модель Black Fret проста. Мы — модель, основанная на членах, когда наши участники присоединяются, и в силу присоединения они становятся покровителями местной музыки. Они получают привилегию номинировать группы, которые им нравятся, посещать множество мероприятий каждый год — в этом году их было более 30 — голосовать за тех, кто получит незначительный или большой грант, а затем отпраздновать награждение этих грантов на торжественное мероприятие, которое мы проводим каждую зиму.За первые два года предоставления грантов мы выделили 250 000 долларов США, а в этом году мы предоставим еще более 200 000 долларов США.

Кендрик: После номинации группа получает возможность воспользоваться нашим консультативным советом, который представляет собой группу из более чем 40 профессионалов музыкальной индустрии в Остине, включая инженеров, продюсеров, агентов по бронированию, юристов в сфере развлечений, экспертов по лицензированию музыки и т. Д. ., чтобы у них был доступ к профессионалам музыкальной индустрии, которые могут помочь продвинуть их карьеру.

После получения гранта у них по-прежнему есть доступ ко всем этим советникам, но теперь у них есть возможность разблокировать полученный грант, создав новую музыку, исполняя свою музыку за пределами Остина или выполняя общественные работы. То есть, например, они могут работать для другой некоммерческой организации в городе и получить грант на сумму более 1000 долларов.

Это дает нам невероятный доступ к творческому процессу: сколько новой музыки создается, сколько общественных работ выполняется.Им выдают свои грантовые доллары, а затем они сообщают нам, на что они тратят эти грантовые доллары, будь то запись альбома или поддержка тура или оплата счета за электричество. Что они будут делать с этими грантовыми долларами, когда они их разблокируют и окажутся у них в карманах, решать им.

Галерея: 2016 30 До 30 лет: Музыка

31 изображений

Setaro: Значит, ответственность происходит заранее, а не после?

Кендрик: Совершенно верно.

Ott: Нам нужен был контроль, который не позволял нам раздавать деньги группе, которая собиралась распасться, после того как прошла через это с Austin Music Foundation. Мы пришли из среды разумной благотворительности, и наличие показателей, основанных на результатах, укрепляет нашу репутацию.

Мы можем точно сказать вам, сколько новых песен мы профинансировали, сколько новых песен поступило в студию звукозаписи, сколько людей распространили свои собственные альбомы, сколько концертов было проведено в США.С. и за рубежом, сколько благотворительных выступлений дали наши артисты. У нас было более 40 концертов для других благотворительных организаций. Мы заплатили группам за выступления на этих благотворительных мероприятиях.

Setaro: Вы, ребята, установили цену членства в 1500 долларов. Что заставило вас установить эту цену?

Ott: Ценовая планка в 1500 долларов была достигнута несколькими способами. Мы хотели, чтобы это была эгалитарная организация, а не организация, в которой один покровитель местной музыки платит 10 000 долларов, а кто-то другой платит 50 долларов, и между ними существуют разные уровни признания.Мы думали, что если вы хотите поддерживать местную музыку через Black Fret, важно, чтобы все были равны. Независимо от того, зарабатываете ли вы 3 миллиона долларов в год или 30 000 долларов в год, вы можете быть равным покровителем. Поэтому мы искали ценовую категорию, которая могла бы соответствовать этому уровню. Мы действительно смотрим на это с двух точек зрения — вопрос материального воздействия на художника, а также ценность для мецената.

Итак, при 1500 долларов в год с сотней участников, после оплаты мероприятий и оплаты музыкантов за их участие в мероприятиях и так далее, это дало нам 100000 долларов в качестве награды нашим музыкантам, что, по нашему мнению, было первой крупной ставкой в основание, которое мы действительно хотели разместить, чтобы завоевать доверие.

Кендрик: После получения степени я работал в отделе управления капиталом в Price Waterhouse в Далласе. Многие люди имели опыт жертвовать тысячи долларов на благотворительность, ходить на ежегодный сбор средств и оказываться в тени, потому что кто-то другой пожертвовал один процент от доверительного фонда, который они унаследовали. Мы хотели разрушить эти традиционные барьеры неравенства доходов и создать сообщество, и это то, что мы сделали.

Люди приходят на наши мероприятия и говорят, что люди обнимают друг друга больше, чем когда-либо раньше.В конце концов, это работает, потому что это люди, которые действительно заботятся о музыке. Они могут зарабатывать 40 000 долларов в год и позволить себе стать членами. Они могут зарабатывать миллион долларов в год и позволить себе быть членами. Таким образом, частью этого является поиск людей, которые потратят время и силы, чтобы действительно принять участие.

Setaro: Как вы набрали первоначальную базу участников для Black Fret?

Отт: Изначально очевидно, что это были наши друзья.

Кендрик: У нас много друзей [ смеется ].На самом деле, у нас была продуманная стратегия — молчать о выпуске Black Fret. Мы не хотели производить большой фурор, и говорят, что мы собирались сделать все эти великие дела, не имея денег, чтобы поддержать это. Так что мы держали это в секрете, пока не набрали 75 человек или около того, а затем начали немного обращаться к прессе. В течение года мы достигли нашей первой сотни членов. Именно тогда мы решили объявить наш первый набор номинантов и объявить о том, что в декабре, девять месяцев спустя, мы собираемся разыграть 100 000 долларов.

Setaro: Есть ли у вас ограничение на членство?

Кендрик: Мы делаем. Разработанную нами модель мы называем «ограниченным справедливым патронажем». Ограниченное количество членов, вносящих равный вклад, чтобы стать меценатами. Откровенно говоря, мы считаем, что это довольно масштабируемая модель для множества различных проектов.

Ott: Мы заявили, что максимальное количество участников составляет 1333 человека. А 1333 члена с доходом 1500 долларов в год — это на 500 долларов меньше 2 миллионов долларов. Это позволяет нам не только давать прямые гранты музыкантам, но и создавать фонды для финансирования будущих грантов и действительно стать учреждением.

Setaro: Не могли бы вы рассказать о поездке на этой модели в другие города?

Ott: В ближайшие несколько лет мы планируем вывести его в другие десять крупных музыкальных городов Северной Америки.

Кендрик: Если у нас будет 1300 человек [на город], вы будете иметь в виду 13000 преданных фанатов музыки по всей стране. Мы будем выделять 20 миллионов долларов в год в виде грантов.

Наше видение состоит в том, чтобы вы могли профинансировать 50 ваших любимых артистов в этом году, всего 500, а затем иметь возможность совершить поездку с этими артистами в эти города, что позволит им получить доступ к большим толпам, предоставив им самолеты, отели и ценные вещи доступ к советникам на каждом из этих рынков.Фактически, мы думаем, что создаем низшую лигу музыки. Идея состоит в том, чтобы попытаться изменить экономику музыкальной индустрии. Профиль риска / доходности этикетки ужасен. Отсюда и подписался контракт на семь альбомов. У звукозаписывающего лейбла было , чтобы иметь такую страховку на выздоровление, если группа действительно ударит. Итак, мы пытаемся найти корни этого.

Ott: Мне очень нравится аналогия с названием низшей лиги местной музыки, потому что мы сознательно создали модель, позволяющую музыкантам получать гранты, выступая за пределами своего внутреннего рынка.Так что, если вы артист Black Fret и получили грант в Остине, если вы пойдете играть на площадках Black Fret на восточном побережье, вы поедете в Нэшвилл, Мемфис, округ Колумбия, Нью-Йорк, Бостон, что у вас, вы? нам за это заплатят из вашего гранта. По сути, это поддержка туров, которую лейблы делали для определенного количества групп. Но даже в те времена на лейблах это не было обычным делом.

Конечно, Black Fret всегда платит своим артистам за то, чтобы они играли. Так что, если вы собираетесь в один из этих городов и будете играть там шоу Black Fret, вам будет платить местное отделение Black Fret за это шоу.Вдобавок ко всему, если вы закажете публичное шоу с другими артистами Black Fret, в частности, присоединившись к лучшим артистам города, вы значительно быстрее увеличите свою фан-базу и достигнете этой критической массы, так что вы начнете привлекать внимание фестивальные туры и так далее.

Кендрик: Это амбициозное решение. Мы работаем над этой концепцией уже 15 лет. Не для того, чтобы пощекотать себе рот, но я чувствую, что мы действительно поняли это. Он растет впечатляющими темпами.Нам нужно всего 13 000 членов по всей стране, и у нас уже есть три процента от них.

Предстоит проделать большую работу, чтобы выяснить, как доставить его в каждый город — каковы лимиты членства, каковы взносы — но дело в том, что я не думаю, что это будет так сложно найти 13 000 человек, которые готовы тратить 100 долларов в месяц, чтобы вести невероятно насыщенную музыкальную жизнь. Черт, я бросал это на компакт-диски, когда зарабатывал себе на жизнь черпанием мороженого.

Setaro: На какие основные цели грантополучатели обычно тратят свои грантовые деньги?

Ott: По ходу дела учиться интересно.Написано 119 песен. Было записано 104 песни, было выпущено 46 новых песен для публики, 195 выступлений за пределами Остина, 11 международных выступлений, 44 выступления для других благотворительных организаций и так далее.

Это даже не отражает всего, что сделал художник. Это просто отражает то, что им нужно сделать, чтобы разблокировать свои грантовые доллары на данный момент. Как только они получат эти грантовые доллары, приятно видеть, что они сделали.

Линкольн Дарем вернулся в студию и записал то, что он считает своим лучшим альбомом на сегодняшний день.Грэм Уилкинсон заплатил за ремонт своей гитары Taylor 1943 года.

Эрин Айви только что закончила гастролировать с альбомом, когда получила грант. Она подумала про себя, как я собираюсь разблокировать свои грантовые доллары? Я столкнулся с ней около десяти месяцев в году, и она сказала, что у нее был самый удивительный год, потому что она провела его, ища некоммерческие организации, чьи миссии ей нравились, и позвонила им по телефону, говоря: «Привет, я Эрин Айви. Могу я прийти и дать вам концерт бесплатно? » Она сказала, что это был один из самых эмоционально насыщенных лет как артистка, которые у нее были, потому что ей удалось получить 9000 долларов из своего гранта в размере 10 000 долларов, играя на благотворительность.

Кендрик: Если вам интересно, в чем заключаются истории успеха, то на самом деле мы только приближаемся к нашему третьему сезону пожертвований. Но наши группы уже подписаны лейблами, в том числе Universal Music Group. Вышло двадцать или тридцать новых релизов. Для меня Black Fret — это художественное превосходство. Мы хотим стоять рядом с симфонией и оперой и говорить, что это лучшие музыканты, которых мы можем найти. Это не аргумент, основанный на необходимости. Речь идет о том, чтобы найти тех людей, которые могут создавать невероятно красивое искусство, и помочь им в этом.

Одна история для меня всегда пронизывает, что самый первый грант, который мы когда-либо выдавали, был Грэхему Уилкинсону. Грэм — белый растафарианец ростом шесть футов четыре дюйма — невероятно душевный, одухотворенный парень. Он приходил ко мне домой, потому что у нас не было офиса. Я вручаю ему чек. Через пятнадцать минут я получаю текстовое сообщение, в котором говорится: «Я хотел, чтобы вы знали, что я сижу перед вашим домом пятнадцать минут и плачу, потому что мне платят за продажу пива, а вы только что заплатили мне, чтобы я написал песню. Впервые когда-либо.”

Black Fret награждает музыкантов Остина на $ 250 000 на Black Ball

2018

Black Ball 2018 был праздником музыки, благотворительности и сообщества (Фото: Билл Такер)

Трудно быть музыкантом в мировой столице живой музыки. В любую ночь художники мирового класса занимаются своим ремеслом за содержимое банки для чаевых. Певцы, отмеченные наградами, остаются на постоянной работе. Места, которые гордятся тем, что обращаются с артистами, довольно закрывают двери в пользу баров без покрытия с импровизированной сценой в углу.

Enter Black Fret. Создавая сообщество представителей индустрии и меломанов, стремящихся сохранить жизнь Остина, эта некоммерческая организация дает ответ на проблемы, беспокоящие местную музыкальную сцену. А 7 декабря на феерии Black Ball в театре Moody Theatre Black Fret вручили 250 000 долларов достойным музыкантам. Это был вечер подарков, музыки и хорошего настроения.

Что такое Black Fret?

Колин Кендрик и Мэтт Отт идут по красной ковровой дорожке перед Чёрным балом 2018 г. (Фото: Билл Такер)

Основанная друзьями и меломанами Колином Кендриком и Мэттом Оттом, Black Fret — это некоммерческая организация, управляемая членами, посвященная созданию устойчивой окружающей среды. где музыканты Остина могут процветать.Члены платят ежегодный взнос, а взамен получают доступ к десяткам интимных шоу в стиле комнаты для прослушивания с участием одних из лучших талантов Остина. Средства направляются в фонд, который предоставляет гранты получателям, проголосовавшим за участие в программе.

Но победители гранта получают не просто чек. Black Fret предоставляет гранты по мере того, как музыканты достигают важных вех в карьере и совершенствуют свое мастерство. У организации также есть успешная программа наставничества. Выдающиеся профессионалы отрасли обучают художников всему, от продвижения до студийной техники.Вся цель состоит в том, чтобы культивировать в Остине культуру устойчивого музыкального совершенства.

Black Ball 2018

Театр Moody Theater — это новый дом для Black Ball (Источник: Билл Такер)

Каждый декабрь Black Fret проводит празднование конца года, известное как Black Ball. Художники, признанные участниками конкурса, получившие звание и престиж шоу крупных наград, получают либо незначительный, либо крупный грант.

Из 20 номинантов награды получили все номинанты 2018 года. С небольшими грантами в размере 5 000 долларов и крупными грантами на общую сумму 20 000 долларов получение награды Black Fret может изменить ход карьеры группы.И награды достаются…

Major Grants

Donovan Keith
Greyhounds
Los Coast
Джейн Эллен Брайант
Джейми Харрис
Wood & Wire
Джефф Планкенхорн
Джефф Планкенхорн
Джефф Планкенхорн 9026 Томар и футбольные клубы

Незначительные гранты

КГБ Техаса
Ребекка Лобе
Дэйв Шер
Пало Дуро
Мегафауна
Гигантская собака
Плохой король
Плохой король
Отис-разрушитель
Калу и Electric Joint

➡️ Продолжайте читать: Томар и ФК сжигают Остин, сцены с зажигательной музыкой души

Вечер музыки и магии

Донован Кейт начинает блестящий Черный шар 2018 года в театре Moody Theater (Источник: Билл Такер)

Но каким было бы мероприятие Black Fret без живых выступлений ? Пятнадцать из 20 номинантов в течение вечера играли аккуратные сеты из двух песен.Несмотря на лаконичность, музыка получилась сенсационной. Эклектичный соул-мужчина Донован Кейт начал ночь с невероятной силой и умением прыгать и играть.

Всю ночь состав участников демонстрировал музыкальное разнообразие Остина. От убивающего гитары тяжелого рока Megafauna до трогательного кантри-звучания Ребекки Лёбе, шоу было полно сюрпризов. Одним из самых любимых зрителей стал недавний номинант на премию Грэмми Wood & Wire. Исполнив партию мятлика четырех на полу, четверка подняла вежливо восторженную толпу Муди на ноги.

Моим сюрпризом этого вечера стал Билли Кинг и Плохой Плохой Плохой. Рок-звезда, сочетающая южный рок, трэш CBGB и нелепые отбивные, я нашла новую местную группу, которую хочу добавить в свою ротацию на Spotify.

Хорошие люди, хорошая музыка, хорошее развлечение

Томар и футбольные клубы ушли с Black Ball 2018 с грантом в размере 20 000 долларов (Источник: Билл Такер)

Вечер завершился взрывным R&B соул-звуком любимца Остинота Томара и ФК. . Как обычно, фронтмен Томар Уильямс приказал толпе встать и поджемовать, пока он метался и танцевал.После своей первой песни он пригласил всех музыкантов присоединиться к нему на сцене для зажигательного кавера на песню Сэма Кука «Bring It On Home».

Театр Moody из тихой и уважительной толпы превратился в возрождение евангельской церкви. После этого музыканты и посетители остались на вечеринке, которая длилась до 2 часов ночи. В вестибюле на первом этаже играл ди-джей, а музыканты брали гитары и играли акустические сеты в мезонине. Прошлые победители, такие как Джина Чавес и Рэй Прим, пообщались с благотворителями и новоявленными лауреатами.

Black Fret — это не просто группа благотворителей, жертвующих деньги на достойное дело. Это семья. Сплоченное племя любителей музыки, которые твердо убеждены, что этот город должен делать все возможное для поддержки местных талантов. Вечер музыки, эмоций и магии, Black Ball 2018 стал триумфальным праздником всего и на музыкальной сцене Остина.

@BillTuckerTSP хочет знать:

Кто ваш любимый исполнитель Black Fret?

Билеты на Madam Radar, вторник, 29 июня 2021 г., 22:00

Покинув горы Северной Джорджии ради Остина в начале этого десятилетия, Келли Грин, Коди Ли и Джейс Кэдл вместе с Вайолет Ли, которую они встретили в городе через рекламу Craigslist, — группа на подъеме.И не без причины. Смесь американы, кантри и блюза в группе быстро сделала их фаворитами, открыв выступление таких исполнителей, как Лукас Нельсон, Билли Джо Шейвер и комик Рон Уайт. Они заслужили похвалы за свое стремительное и энергичное живое выступление, а также дважды получали грант Black Fret Grant, который вручается восходящим группам в Остине, штат Техас. Тем не менее, после двух альбомов в их карьере, группа захотела перемен — после того, как поняла, что их сдерживает немного неожиданный, немузыкальный элемент.В то время группа называлась Texas K.G.B. Нет, они не были частью какого-то техасского тайного общества или сторонниками российской тайной полиции. Вместо этого название группы пришло от самой Грин — Келли Грин Бэнд. Когда они только образовались, Грин был ведущим участником и лицом группы. Однако это не помешало осторожным заграничным букерам держаться подальше от группы, несмотря на их музыкальные достоинства, из-за кажущейся провокационности их имени. Когда в 2017 году к группе присоединилась Леа, на сцену выходили трое сильных певцов и авторов песен.Больше не казалось правильным, чтобы имя фокусировалось на одном человеке. После того, как они завершили свой последний альбом, продюсер группы Горди Квист из Band of Heathens предложил им подумать о смене названия. Поскольку за три года, прошедшие с момента создания группы, время стало гораздо более политическим, для них настало время покинуть Texas K.G.B. в прошлом.

После нескольких мозговых штурмов в течение нескольких месяцев, наконец, щелкнуло имя. Было много сильных соперников, но в конечном итоге победила мадам Радар.Грядущий одноименный альбом Madam Radar намечен к независимому выпуску в начале 2020 года, и очевидно, что смена названия подбодрила их. В каждой песне на пластинке легко услышать вклад разных исполнителей. Процесс сотрудничества укрепил и без того напряженные песни и позволил им процветать. Такие песни, как «Друг друга» и «Юная дикая любовь», демонстрируют, насколько плодотворной была плавность этого процесса. Каждая песня, хотя и о двух совершенно разных предметах (первая — о важности системы поддержки, а вторая — об испытаниях, которые приносят отношения), написана разными авторами, но в своей основе остается верной звучанию группы.Холодная обстановка позволила мадам Радар быть на высоте. В планах на большой 2020 год, помимо выпуска альбома, еще впереди тур, группа воодушевлена перспективами того, что впереди. Несмотря на то, что они сделали то же самое, что и Texas K.G.B., мадам Радар не оглядывается назад. С новым альбомом, готовым к выпуску, Madam Radar с нетерпением ждут начала следующей главы своей бурно развивающейся карьеры. Следите за их новым синглом Carolina, который вышел в начале 2020 года.

границ | Характеристика модальностей передачи сигналов рецепторов простагландина E2 EP2 и EP4 выявляет перекрестные помехи и роль микротрубочек

Введение

Способность клеток реагировать на окружающую среду имеет решающее значение для их функции. Важными участниками передачи внеклеточной информации во внутриклеточные сигнальные события являются рецепторы, связанные с G-белком (GPCR) (1). Пространственно-временная организация GPCR внутри клеточной мембраны позволяет этим рецепторам вызывать точно настроенные клеточные ответы на различные лиганды.

Простагландины представляют собой липидные медиаторы, которые представляют собой распространенный тип лиганда GPCR. Простагландины происходят из метаболизма арахидоновой кислоты, катализируемого циклооксигеназой (ЦОГ), и проявляют разностороннее действие в самых разных тканях (2, 3). Простагландин E2 (PGE2) передает сигнал через четырем GPCR EP1-4, экспрессируемым в различных комбинациях на плазматической мембране клеток (4). PGE2 модулирует несколько ключевых иммунологических процессов, включая активацию, миграцию и продукцию цитокинов различных иммунных клеток, таких как дендритные клетки (DC), макрофаги и Т-лимфоциты (3, 5-8).Несмотря на то, что это известный медиатор воспаления, повышенные концентрации PGE2 были связаны с высоко иммунодепрессивным микроокружением опухоли (TME) нескольких типов рака (9-13).

ДК обычно наблюдаются в ТМЭ солидных опухолей (14). Тем не менее, несмотря на их способность генерировать противоопухолевый иммунитет, TME-резидентные DC часто демонстрируют нарушенную или дефектную функцию (15). Высокие уровни PGE2 в TME могут играть роль в подавлении фенотипа DC, поскольку PGE2 способствует продукции IL-10 DCs (16).С другой стороны, стимулируя растворение богатых актином адгезионных структур, называемых подосомами, PGE2 также важен для индукции высоко мигрирующего фенотипа, типичного для зрелых DC и критически важного для иммунитета (6). Понимание того, как PGE2 выполняет свою двойную функцию в DC, может предложить новые пути к обращению вспять нежелательной иммуносупрессии DC в контексте противоопухолевого иммунитета.

PGE2 модулирует только функцию постоянного тока через EP2 и EP4 (6, 17, 18). Например, ранее было показано, что PGE2 вызывает растворение подосом через сигнальную ось cAMP-PKA-RhoA ниже EP2 и EP4 (8).PGE2-индуцированное растворение подосом является важным шагом на пути к созреванию DC и приобретению высоко мигрирующего фенотипа, но вклад рецепторов в эти процессы все еще плохо определен.

Передача сигналов через EP2 и EP4 преимущественно трансдуцируется стимулирующим белком Gα (Gα _s), что приводит к повышенной активности аденилатциклазы (AC) и последующему повышению внутриклеточных уровней циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) (19, 20 ). Важным различием между EP2 и EP4 является сообщаемая способность EP4 также связываться с ингибирующим белком Gα (Gα _i), тем самым подавляя образование цАМФ и активируя путь фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) (21, 22).Более того, в отличие от EP2, EP4 быстро интернализуется при связывании лиганда (23-25). В целом, эти наблюдения подтверждают, что модальности сигналов (интенсивность, продолжительность, нижестоящие эффекторы), вероятно, различаются между EP2 и EP4 и что лучшее понимание дифференциальной передачи сигналов EP2 и EP4 является ключом к пониманию и предсказанию эффектов PGE2 в биологии DC.

Здесь мы стремились охарактеризовать события ранней передачи сигналов EP2 и EP4 в ответ на PGE2 в миелоидных клетках и связать их с растворением подосом в DCs.Сначала мы продемонстрировали, что в DCs PGE2 ведет к растворению подосом в первую очередь посредством передачи сигналов EP4. Затем мы показываем, что избирательная стимуляция EP2 и EP4 приводит к различным профилям продукции цАМФ, и предполагаем взаимный контроль эффективности передачи сигналов рецепторами. Наконец, мы демонстрируем, что целостность сети кортикальных микротрубочек важна для эффективной передачи сигналов EP2 и EP4. Модуляция передачи сигналов PGE2 считается важной терапевтической возможностью в противоопухолевой иммунотерапии.Наши результаты улучшают наше понимание ранней передачи сигналов EP2 и EP4 и могут, таким образом, способствовать разработке эффективных и специфических модуляторов сигнальных рецепторов PGE2, которые могут вносить вклад в обратную иммуносупрессию опухоли (26).

Материалы и методы

Химические вещества и реагенты

Клетки обрабатывали несколькими соединениями, которые активировали или ингибировали EP2 и EP4 (фармакологические подробности см. В базе данных одобренных FDA соединений на сайте www.bindingdb.org): Агонист EP2 (R) — Бутапрост (Sigma), агонист EP4 L-

8 (Cayman Chemicals), конкурентный антагонист EP2 AH6809 (Cayman Chemicals), конкурентный антагонист EP4 GW627368X (Cayman Chemicals) или Ah33848 (Cayman Chemicals), токсин коклюша (TOCRIS), PGE2 ), Токсин коклюша (PTx, Calbiochem, Сан-Диего, Калифорния) и нокодазол (Sigma).Концентрации, используемые для различных соединений, основаны на предыдущей литературе (27–31) в сочетании с анализами жизнеспособности (выполняемыми с помощью окрашивания трипановым синим). Соединения, используемые для иммунофлуоресцентного окрашивания, представляли собой мышиные антитела против винкулина (Sigma, V9131), козьи антитела против мышиных (H&L) -Alexa488 и козьи против мышиных (H&L) -Alexa647 вторичных антител (Invitrogen), фаллоидин, конъюгированный с Alexa488 (Invitrogen). , A12379) и фаллоидин, конъюгированный с Texas Red (Invitrogen, T7471), Mowiol (Sigma).

Культура клеток

RAW 246.7 клеток культивировали в среде RPMI-1640 (Gibco) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS, Greiner Bio-one), 1 мМ ультра-глутамина (BioWitthaker) и 0,5% антибиотика-антимитотика (AA, Gibco). iDC получали из PBMC, как описано ранее (32, 33), и культивировали в среде RPMI 1640 (Gibco), снабженной 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS, Greiner Bio-one). Трансфекция t-Epac-vv (34) (подарок от К. Джалинка), Gα _s -GFP (подарок от М. Разеника), Gα _i -GFP и Gα _i1 -Цитрин (35) (подарок из.Gilman), Gγ ₂ -CFP и Gβ ₁ дикого типа (оба предоставлены M. Adjobo-Hermans) были выполнены с Fugene HD (Roche) в соответствии с протоколом производителя и визуализированы через 24 часа. Стабильные клеточные линии, экспрессирующие Gα _s -GFP и Gα _i -GFP, поддерживали с использованием соответствующих антибиотиков. Клетки высевали за день до проведения измерений или трансфекции в чашки Willco (Willco Wells BV) по 400000 клеток на чашку или в 96-луночный планшет (микропланшет BD Falcon) по 40000 клеток / лунку или в 4-луночное покровное стекло Lab-Tek II с камерами. (Nunc) при 100000 клеток / камеру.Перед визуализацией среду заменяли 1 мл среды RPMI без фенолового красного, чтобы избежать фоновой флуоресценции.

Анализ растворения подосом и иммунофлуоресценция Widefield

Для экспериментов с агонистами iDC обрабатывали (R) -бутапростом, L-

8 или 10 мкМ PGE2 в течение 10 мин. Для экспериментов с антагонистами и коклюшным токсином iDC предварительно обрабатывали 3 мкМ AH6809 в течение 1 часа, 10 мкМ GW627368X в течение 1 часа, 100 нг / мл коклюшного токсина в течение 16 часов, как описано ранее (22), или оставляли без лечения перед добавлением PGE2.После стимуляции iDC фиксировали в 3,7% (мас. / Об.) Формальдегиде в PBS в течение 10 мин. Клетки пропускали через 0,1% (об. / Об.) Triton X-100 в PBS в течение 5 минут и блокировали 2% (мас. / Об.) BSA в PBS. Клетки инкубировали с мышиным антителом против винкулина в течение 1 часа. Затем клетки промывали PBS и инкубировали с вторичным антителом GaM- (H&L) и фаллоидином в течение 45 мин. Наконец, образцы были промыты PB перед заливкой в Mowiol. Клетки получали на флуоресцентном микроскопе Leica DM с 63 × PL APO 1.3 NA масляно-иммерсионный объектив и высокопроизводительная интегрирующая CCD-камера COHU (COHU, Сан-Диего, Калифорния) или микроскоп Zeiss LSM 510, оснащенный масляным иммерсионным объективом PlanApochromatic 63x / 1.4 NA. Изображения были проанализированы с использованием программного обеспечения на Фиджи (36).

Эксперименты с резонансной передачей энергии Фёрстера

Изображения

RAW-макрофагов, экспрессирующих t-Epac-vv, получали с помощью инвертированного широкоугольного микроскопа BD Pathway (BD biosciences), оснащенного объективом 20X 0,75 N.A. (Olympus LUCPLFLN).Лампа галогенида металла ртути в сочетании с фильтром возбуждения (440/10) использовалась для возбуждения mTurqoise. Эмиссию флуоресценции фильтровали с использованием дихроичного зеркала (458-DiO1) и фильтров (479/40 и 542/27 для эмиссии mTurquoise и Venus, соответственно). Излучение регистрировалось охлаждаемой ПЗС-камерой высокого разрешения (1344×1024 пикселей, 0,32 мкм / пикс). Образцы готовили в 96-луночном планшете (микропланшет BD Falcon), из которого использовали внутренние 60 лунок. Клетки предварительно обрабатывали 100 нг / мл коклюшного токсина в течение 16 часов или оставляли без обработки перед добавлением 3 мкМ AH6809 на 1 час или 10 мкМ GW627368X на 1 час, с 5 мкМ нокодазолом и без него в течение 20 минут. получено с последующим автоматическим добавлением PGE2 и последующим получением еще 20-метровых изображений эмиссии бирюзы и Венеры (задержка t = 10 с).Средняя интенсивность флуоресценции Венеры и сигнала mTurquoise в клетке корректировалась путем вычитания фонового сигнала в каждом изображении и канале перед делением средней интенсивности флуоресценции Венеры на mTurquoise для получения отношения FRET. Значения были нормализованы к среднему значению отношения первых шести точек данных до стимула.

Эксперименты по визуализации флуоресценции на протяжении всей жизни

Эксперименты FLIM в частотной области на трансфицированных макрофагах RAW были выполнены с использованием инвертированного широкоугольного микроскопа Nikon TE2000-U и флуоресцентной насадки Lambert Instruments (LIFA; Lambert Instruments) для получения изображений на протяжении всей жизни.Светоизлучающий диод (Lumiled LUXEON III, λ _max = 443 нм), модулированный на частоте 40 МГц, использовался для возбуждения CFP. Детектирование флуоресценции выполняли с помощью комбинации модулированного (40 МГц) усилителя изображения (II18MD; Lambert Instruments) и камеры CCD 640×512 пикселей (CCD-1300QD; VDS Vosskühler). Эмиссию CFP детектировали через узкий эмиссионный фильтр (475/20 нм; Semrock), чтобы подавить любую эмиссию флуоресценции от флуорофора цитрина. Измерения FLIM были откалиброваны с помощью 1 мкМ раствора пиранина (HPTS), время жизни которого было установлено равным 5.7 нс. Все изображения FLIM были рассчитаны на основе фазовых сумм из 12 записанных изображений со временем экспозиции отдельных изображений от 200 до 400 мс. Для фотообесцвечивания акцептора использовали ртутную лампу 100 Вт УШ-102ДН (Nikon). Клетки предварительно обрабатывали 25 мкМ Ah33848 в течение 1 ч или оставляли без обработки и клетки стимулировали 10 мкМ PGE2 или 10 мкМ Butaprost.

Статистика и воспроизводимость

Вся обработка изображений проводилась с использованием программного обеспечения Fiji / ImageJ. Подосомный подсчет производился полуавтоматически.Вкратце, к изображению фаллоидина применяли средний фильтр (радиус 3 пикселя), после чего вручную выбирали кластеры подосом. Впоследствии для обнаружения и подсчета подосом использовался искатель максимума Фиджи. Данные анализа растворения подосом и экспериментов FRET обрабатывали с использованием программного обеспечения Microsoft Excel и GraphPad Prism 8. Данные экспериментов FLIM были проанализированы с помощью OriginPro 8. Все статистические анализы были выполнены с использованием GraphPad Prism 8. Конкретный статистический тест, множественные корректировки тестирования и количество повторов, использованных для каждого рисунка, указаны в легенде рисунка.Нормальность распределения данных оценивалась визуальным контролем данных и тестом нормальности Шапиро-Уилка. P -значения <0,05 считались статистически значимыми для всех экспериментов. Статистический анализ проводился только для сравнений, указанных на рисунках.

Результаты

EP4 в первую очередь способствует растворению подосом, индуцированному простагландином E2 в дендритных клетках

Чтобы оценить различный вклад EP2 и EP4 в опосредование передачи сигналов PGE2 в DC, мы сначала определили, может ли передача сигналов EP2 и EP4 приводить к растворению подосом. .Для этого мы обрабатывали незрелые DC (iDC) с помощью PGE2 или хорошо зарекомендовавших себя и селективных агонистов EP2 и EP4 и количественно определили количество подосом на клетку (Фигуры 1A, B ) . В соответствии с нашими предыдущими наблюдениями, добавление PGE2 привело к почти полной потере подосом в iDC. Интересно, что как EP2-, так и EP4-специфическая стимуляция также уменьшала количество подосом, при этом стимуляция агонистом EP4 была немного более эффективной (Рисунок 1B). Эти результаты показывают, что индивидуальная передача сигналов EP2 и EP4 ниже по течению может приводить к растворению подосом.

Рисунок 1 Индуцированное простагландином E2 (PGE2) растворение подосом в незрелых дендритных клетках человека (iDC) в основном опосредуется EP4. (A) Репрезентативные изображения iDC, полученных из PBMC, которые не подвергались лечению или были обработаны 1 мкМ агониста EP4 L-

8, 1 мкМ агониста EP2 (R) -бутапроста, оба 1 мкМ L-

8 и 1 мкМ (R) -Бутапрост, 1 мкМ PGE2 отдельно или 1 мкМ PGE2 после предварительной обработки антагонистом EP2 (антагонистом) AH6809, антагонистом EP4 GW627368X или одновременно AH6809 и GW627368X.Клетки окрашивали на актин (зеленый) и винкулин (пурпурный). Масштабная линейка = 10 мкм. (B) iDC обрабатывали различными концентрациями агониста EP2 (назад) (R) -бутапроста, агониста EP4 L-

8 или обоих (R) -бутапроста и L-

8. Клетки окрашивали на актин и винкулин, и количество подосом на изображение определяли количественно и нормализовали к необработанному контролю. Клетки, обработанные 10 мкМ PGE2, были включены в качестве положительного контроля. Столбики ошибок представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение. Представленные данные получены от двух разных доноров.нс, недостоверно, * P <0,05; ^### P <0,001 по сравнению с необработанным контролем, дисперсионный анализ Уэлча с тестом множественного сравнения Т3 Даннета. (C) iDC обрабатывали различными концентрациями PGE2 с предварительной обработкой или без предварительной обработки антагонистом EP2 (антагонистом) AH6809, антагонистом EP4 GW627368X или обоими AH6809 и GW627368X. Клетки окрашивали на актин и винкулин, и количество подосом на изображение определяли количественно и нормализовали к необработанному контролю. Столбики ошибок представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение.Представленные данные получены от трех разных доноров. нс, недостоверно, * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001; ^## P <0,01, ^### P <0,001 по сравнению с необработанным контролем, дисперсионный анализ Уэлча с тестом множественного сравнения Т3 Даннета.

Установив, что передача сигналов EP2 и EP4 может приводить к растворению подосом, мы стремились исследовать соотв. Вклад передачи сигналов EP2 и EP4. Мы пришли к выводу, что это будет трудно оценить с помощью агонистов из-за различного сродства к их рецепторам.Поэтому вместо этого мы предварительно обработали клетки хорошо охарактеризованными и селективными конкурентными антагонистами EP2 и EP4 для блокирования передачи сигналов с последующей стимуляцией природным лигандом PGE2 и последующим количественным определением растворения подосом. На рисунке 1C показано, что ингибирование EP4 снижает растворение подосом при стимуляции 0,01–0,1 мкМ PGE2, в то время как блокирование EP2 не оказывает никакого эффекта. Это указывает на то, что при более низких концентрациях PGE2 EP4 отвечает за индукцию потери подосом. Интересно, что при 1 мкМ PGE2 блокирование EP4 ослабляет растворение подосом только при совместном введении антагониста EP2, предполагая, что запуск EP2 с помощью PGE2 может каким-то образом влиять на активность EP4.При самой высокой концентрации PGE2 (10 мкМ) нельзя полностью исключить, что антагонисты не замещаются PGE2, что затрудняет интерпретацию этих конкретных результатов.

Вместе эти результаты предполагают, что EP4 в первую очередь способствует PGE2-индуцированному растворению подосом. Важно отметить, что в последующих экспериментах мы используем селективные антагонисты рецепторов в сочетании с природным лигандом PGE2 для определения индивидуального вклада EP2 и EP4 в опосредование передачи сигналов PGE2.

EP2 и EP4 по-разному стимулируют продукцию цАМФ

Индуцированная PGE2 потеря подосом в DC опосредуется осью передачи сигналов цАМФ-PKA-RhoA, расположенной ниже EP2 и EP4 (8). Поскольку наши результаты убедительно свидетельствуют о том, что EP4 в первую очередь ответственен за потерю подосом, мы попытались определить, вызывает ли EP4 более сильные ответы цАМФ на PGE2, чем EP2. Чтобы определить индивидуальный вклад EP2 и EP4 в индуцированное PGE2 повышение внутриклеточных уровней цАМФ, мы измерили начало продукции цАМФ в живых макрофагах RAW, которые эндогенно экспрессируют как EP2, так и EP4 (дополнительный рисунок 1) (37) и хорошо себя чувствуют. -принята в качестве модели суррогатной клетки для изучения ДК (38) с использованием измерений отношения датчика цАМФ t-Epac-vv на основе Фёрстеровского резонансного переноса энергии (FRET) (34).Поскольку связывание цАМФ с t-Epac-vv снижает FRET между флуорофорами донора mTurquoise и акцептора Венеры, снижение соотношения FRET в макрофагах является прямым показателем продукции цАМФ (Фигуры 2A, B ) . После добавления PGE2 цАМФ производился немедленно и достиг максимальной концентрации примерно через 40 секунд, снижаясь до более низких уровней через 200 секунд (рис. 2C). Чтобы сравнить кинетику цАМФ в различных условиях обработки, мы количественно определили пик продукции цАМФ и скорость продуцирования, как показано на рисунке 2D.Оба параметра масштабировались с увеличением концентрации PGE2, что указывает на то, что скорость и величина индуцированного ответа цАМФ зависят от дозы (рис. 2E).

Рис. 2 EP2 и EP4 вызывают различные реакции циклического аденозинмонофосфата (цАМФ). (A) Схематическое изображение внутримолекулярного датчика цАМФ FRET t-Epac-vv. Связывание цАМФ с t-Epac-vv снижает передачу энергии резонанса Фёрстера (FRET) между донорными флуорофорами mTurquoise и акцепторами Венеры t-Epac-vv, делая пониженное соотношение интенсивностей флуоресценции прямой мерой накопления цАМФ [адаптировано из ( 34)]. (B) Сигналы mTurquoise (голубой) и Venus (желтый) были получены с помощью широкопольной микроскопии (панели WF). После вычитания фона в каждом изображении и канале соотношение FRET было рассчитано как интенсивность Венеры по сравнению с интенсивностью mTurquoise для каждой временной точки и было нормализовано к среднему значению до стимула (панели FRET). Нормализованные значения FRET варьируются от 0 (красный) до 1 (синий). Масштабная линейка = 5 мкм. (C) FRET-отношения t-Epac-vv до и после добавления различных концентраций простагландина E2 (PGE2) измеряли в временно трансфицированных RAW-макрофагах.Контроль выполняли только с добавлением буфера. Представленные данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение от ≥5 клеток на состояние. (D) Пример кривой FRET, которая иллюстрирует определение относительного пика цАМФ и скорости продуцирования цАМФ. Амплитуда пика цАМФ определялась как максимальное уменьшение отношения FRET. Скорость продукции цАМФ определяли количественно путем определения наклона между конечной временной точкой до стимула и точкой времени, в которой наблюдались минимальные соотношения FRET, с использованием линейной аппроксимации по всем включенным временным точкам. (E) Пик продукции цАМФ и скорость продуцирования цАМФ были измерены по кривой FRET отдельных клеток из (C) , и средний пик был нанесен на график как функция средней скорости продуцирования для каждого условия. Столбики ошибок представляют стандартное отклонение для обоих параметров. (F, H, J) Соотношения FRET измеряли после добавления PGE2 в клетки, предварительно обработанные антагонистом EP4 (антагонистом) GW627368X (F) , предварительно обработанные антагонистом EP2 AH6809 (H) или предварительно обработанные обоими GW627368 и AH6809 (J) .Представленные данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение от ≥4 клеток на состояние. (G, I, K) Относительный пик продукции цАМФ и скорость продуцирования цАМФ были измерены от (F, H, J) , соответственно. Столбики ошибок представляют стандартное отклонение для обоих параметров.

По сравнению только с PGE2, ингибирование EP2 привело к более высоким уровням цАМФ при всех протестированных концентрациях PGE2, в то время как концентрации цАМФ снизились в аналогичной степени (рис. 2F). Скорость продукции цАМФ, индуцированная PGE2, и пик цАМФ оставались дозозависимыми от ингибирования EP2, поскольку оба параметра были масштабированы с концентрацией PGE2 (фигура 2G).Эти результаты показывают, что блокада EP2 увеличивает эффективность передачи сигналов EP4 в ответ на PGE2. Ингибирование EP4 привело к совершенно иному ходу продукции цАМФ. В отличие от ингибирования EP2, ингибирование EP4 предотвращало устойчивую продукцию цАМФ при концентрациях PGE2 до 0,1 мкМ, но позволяло получить сильный ответ цАМФ при ≥ 1 мкМ (Фигуры 2H, I ) . Кроме того, этот сильный ответ цАМФ не ослабевал, как это наблюдалось в отсутствие ингибирования EP4. По сравнению только с PGE2, величина сильного ответа цАМФ, наблюдаемого при ингибировании EP4, предполагает, что активность EP4 может каким-то образом ухудшать эффективность передачи сигналов EP2.Чтобы убедиться, что EP2 и EP4 полностью блокируются концентрациями антагонистов, используемых в наших экспериментах, мы измерили продукцию цАМФ при одновременном ингибировании EP2 и EP4 (рис. 2J). Предварительная обработка обоими антагонистами эффективно ингибировала общую продукцию цАМФ при 0,1 и 1 мкМ PGE2, показывая, что оба рецептора полностью блокируются при физиологических концентрациях PGE2 (Фигуры 2J, K ) . Важно отметить, что, поскольку 10 мкМ PGE2 все еще индуцировал небольшое количество цАМФ, даже в присутствии обоих антагонистов (рис. 2J), мы решили опустить это условие в последующих экспериментах, поскольку один или оба антагониста могут быть вытеснены высоким концентрация PGE2.

Наши результаты демонстрируют, что избирательная стимуляция EP2 и EP4 с помощью PGE2 индуцирует кинетически различные профили продукции цАМФ. В то время как передача сигналов PGE2-EP4 приводит к быстрой и временной продукции цАМФ, которая увеличивается пропорционально концентрациям лиганда, передача сигналов PGE2-EP2 индуцируется только концентрациями PGE2 1 мкМ и выше, а повышение цАМФ является более продолжительным. Мы также показываем, что совместная стимуляция EP2 и EP4 взаимно ослабляет их сигнальную эффективность, поскольку оба рецептора индуцируют более высокую продукцию цАМФ, когда они индивидуально запускаются PGE2.

EP4-связанный Gα

_i Тонко настраивает продукцию цАМФ, индуцированную простагландином E2

Учитывая, что EP2 и EP4 по-разному контролируют динамику цАМФ, мы стремились определить факторы, которые способствуют этим различиям. Поскольку было показано, что ингибирующий G-белок Gα _i соединяется с EP4 (22), мы предположили, что Gα _i ослабляет PGE2-индуцированный ответ цАМФ в клетках, экспрессирующих EP4. Чтобы продемонстрировать, что EP4 избирательно активирует Gα _i также в макрофагах, мы провели визуализацию времени жизни флуоресценции (FLIM) для измерения FRET между Gγ (Gγ-CFP), меченным голубым флуоресцентным белком (CFP), и Gα _i (Gα), меченным цитрином. _i -Citrine).Время жизни флуоресценции донора FRET (CFP) снижалось при совместной экспрессии с акцептором (цитрином) и восстанавливалось до контрольных уровней после фотообесцвечивания акцептора (рис. 3A), что указывает на то, что FRET происходит между Gγ-CFP и Gα _i-цитрин . Поскольку известно, что Gα _i претерпевает конформационные перестройки при активации (39), а FRET между Gγ-CFP и Gα _i-цитрин, вероятно, подвержен таким перестройкам, изменение времени жизни флуоресценции ожидается при стимуляции EP4.Обработка PGE2 вызвала постепенное уменьшение продолжительности жизни донорского флуорофора, в то время как не наблюдалось сдвига в фазе жизни ни при ингибировании EP4, ни при селективной стимуляции EP2 (Рисунок 3B). Эти данные подтверждают, что PGE2 индуцирует активацию Gα _i только через EP4.

Рисунок 3 Связанный с EP4 Ga _i подавляет индуцированную простагландином E2 (PGE2) продукцию циклического аденозинмонофосфата (цАМФ). (A) Макрофаги RAW трансфицировали только Gγ-CFP или Gγ-CFP (донор), Gα _i-цитрин (акцептор) и Gβ дикого типа вместе.Среднее время жизни Gγ-CFP для отдельных ячеек было рассчитано из изображений FLIM в частотной области, и распределения были подогнаны с помощью гауссова профиля (сплошные линии) для получения среднего времени жизни. Фотообесцвечивание Gα _i -цитрина использовали в качестве контроля возникновения FRET. (B) Среднее время жизни донора в клетках, экспрессирующих как донор, так и акцептор, нанесено на график до и после добавления 10 мкМ PGE2 в отсутствие или в присутствии антагониста EP4 Ah33848 или после добавления 10 мкМ агониста EP2 Butaprost.Представленные данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение от ≥2 клеток. (C) Соотношения FRET t-Epac-vv до и после добавления PGE2 измеряли в временно трансфицированных RAW-макрофагах, которые оставались необработанными или предварительно обрабатывались Gα _i ингибитором коклюшного токсина (PTx). Контроли выполняли с добавлением только буфера. Представленные данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение измерений для ≥4 клеток на одно условие. (D) Пик цАМФ и скорость продуцирования цАМФ определяли количественно, как описано на Фигуре 2D из (C) , и средний пик наносили на график как функцию средней скорости продуцирования для каждого условия.Столбики ошибок представляют стандартное отклонение для обоих параметров. (E) iDC обрабатывали различными концентрациями PGE2 с предварительной обработкой PTx или без нее. Клетки окрашивали на актин и винкулин, и количество подосом на изображение определяли количественно и нормализовали к необработанному контролю. Столбики ошибок представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение. Представленные данные получены от трех разных доноров. ** P <0,01, *** P <0,001, дисперсионный анализ Уэлча с тестом множественного сравнения Т3 Даннета.

Чтобы определить последствия EP4-опосредованной активации Gα _i на передачу сигналов PGE2, мы измерили повышение уровня цАМФ с использованием t-Epac-vv при ингибировании Gα _i токсином коклюша (PTx).Блокада Gα _i значительно увеличивала пиковые концентрации цАМФ и продукцию, индуцированную 0,1 мкМ PGE2 и в меньшей степени также 1 мкМ PGE2 (рис. 3C), указывая на то, что Gα _i ослабляет продукцию цАМФ наиболее сильно при более низких концентрациях PGE2. Эффект ингибирования Gα _i на продукцию цАМФ более четко изображен на Фигуре 3D, где после добавления PTx наблюдаются более высокий пик цАМФ и повышенная скорость продуцирования.

Затем, чтобы исследовать, может ли EP4-опосредованная активация Gα _i ослаблять цАМФ-зависимые процессы, такие как растворение подосом, мы определили опосредованную PGE2 потерю подосом в iDC с обработкой PTx или без нее.Мы обнаружили, что ингибирование Gα _i привело к незначительному увеличению потери подосом при всех протестированных концентрациях PGE2, при этом 1 мкМ PGE2 является статистически значимым, тогда как 0,01 и 0,1 мкМ PGE2 демонстрируют незначительную, но четкую тенденцию (рис. 3E). Следует учитывать, что такие низкие концентрации PGE2 менее эффективны в индуцировании растворения подосом (рис. 1C), что затрудняет оценку эффекта лечения PTx. Тем не менее, этот результат указывает на то, что подавление продукции цАМФ, опосредованное Gα _i, также влияет на клеточные решения ниже EP2 и EP4.

Вместе эти находки показывают, что Gα _i подавляет начало продукции цАМФ, предполагая, что ось PGE2-EP4-Gα _i может действовать как привратник передачи сигналов, когда низкие уровни PGE2 незначительно колеблются.

EP2- и EP4-опосредованная передача сигналов требует целостности кортикальных микротрубочек

Поскольку взаимодействие между G-белками и тубулином хорошо документировано, а также их локализация вдоль микротрубочек (40-42), мы исследовали, важна ли целостность микротрубочек для PGE2-индуцированной производство цАМФ.Мы обнаружили, что нарушение микротрубочек (дополнительный рисунок 2) нарушает регуляцию PGE2-индуцированного повышения цАМФ (рисунок 4A). Более конкретно, когда оба рецептора активированы, ослабление ответа цАМФ нокодазолом наблюдалось только при 1 мкМ PGE2, а не при 0,1 мкМ PGE2 (Фигуры 4A, B ) . Однако при ингибировании EP2 скорость продукции цАМФ и максимальные уровни цАМФ, индуцированные PGE2-EP4, снижались при всех испытанных концентрациях PGE2 (Фигуры 4C, D ) . Наконец, ингибирование EP4 показало, что сильный и устойчивый ответ цАМФ PGE2-EP2 полностью предотвращается разрывом микротрубочек (Фигуры 4E, F ) .Эти результаты демонстрируют, что ответ цАМФ, опосредованный Gα _s, на PGE2 зависит от интактной сети микротрубочек и что нарушение этой сети снижает эффективность передачи сигналов как EP2, так и EP4, причем активность EP2 более чувствительна к целостности микротрубочек, чем активность EP4.

Рисунок 4 Эффективная передача сигналов EP2 и EP4 зависит от целостности микротрубочек. (A, C, E) Коэффициент передачи энергии резонанса Фёрстера (FRET) t-Epac-vv измеряли в клетках, которые не были обработаны или предварительно обработаны нокодазолом (Noc.) до и после добавления простагландина E2 (PGE2). Показаны соотношения, полученные в клетках в отсутствие антагонистов (A) , в присутствии антагониста EP2 AH6809 (C) или антагониста EP4 GW627368X (E) . Контроли выполняли с добавлением только буфера. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение от ≥5 клеток на состояние. (B, D, F) Пик продукции циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) и скорость продуцирования цАМФ измеряли по кривой FRET отдельных клеток из (A, C, E) , соответственно, и средний пик был график как функция средней производительности на одно условие.Столбики ошибок представляют стандартное отклонение для обоих параметров.

Обсуждение

Это исследование охарактеризовало модальности передачи сигналов EP2 и EP4, чтобы лучше понять ответы DC и макрофагов, вызываемые PGE2. Наше первое важное наблюдение состоит в том, что избирательная активация EP2 и EP4 агонистами приводит к различным результатам по сравнению с активацией PGE2 в присутствии селективных антагонистов рецепторов. Более конкретно, когда рецепторы индивидуально активируются селективным агонистом, растворение подосом почти одинаково индуцируется EP2 и EP4, тогда как растворение подосом в основном опосредуется EP4 после добавления природного лиганда PGE2 в присутствии селективных антагонистов.На протяжении всего этого исследования мы последовательно применяли селективные антагонисты для определения вклада отдельных рецепторов в передачу сигналов PGE2 и показали, что 1) как EP2, так и EP4 передают сигнал более эффективно, когда они избирательно активируются их естественным лигандом PGE2; 2) EP4 индуцирует дозозависимую и временную продукцию цАМФ, тогда как EP2 вызывает устойчивый ответ цАМФ только при высокой концентрации PGE2; 3) связанный с EP4 Gα _i подавляет как индуцированное PGE2 образование цАМФ, так и растворение подосом; 4) нарушение микротрубочек препятствует эффективной передаче сигналов обоих рецепторов, особенно сильно влияя на EP2.

Здесь мы также показываем, что вызванная PGE2 потеря подосом в iDCs (18) по-разному контролируется с помощью EP2 и EP4. PGE2-индуцированное растворение подосом является первым шагом на пути к приобретению DCs быстро мигрирующего фенотипа (18, 43). Фактически, PGE2 является важным фактором, индуцирующим созревание DC, и при использовании селективных агонистов было высказано предположение, что как EP2, так и EP4 играют сходные роли в этом процессе (6, 16). Наши результаты предполагают, что это может быть не так и что EP4, вероятно, является наиболее преобладающим рецептором, обеспечивающим передачу сигналов PGE2, которая ведет к растворению подосом и индукции мигрирующих зрелых DCs.Это согласуется с предыдущими результатами экспериментов по нацеливанию на гены на мышах, где было обнаружено, что передача сигналов PGE2-EP4 способствует миграции и созреванию клеток Лангерганса, тем самым инициируя кожные иммунные ответы (44). Сходным образом, другие иммунологические процессы, опосредованные PGE2, такие как продукция цитокинов и активация Т-клеток, как сообщается, по-разному контролируются EP2 и EP4 (45–47). Нокдаун EP2 или EP4 в DC, возможно, в сочетании с использованием агонистов и антагонистов, может в конечном итоге помочь прояснить эти различия.Однако, поскольку EP2 и EP4 всегда совместно экспрессируются в DC, еще предстоит определить, не влияет ли нокдаун одного рецептора на паттерны экспрессии другого рецептора.

Ранние исследования, характеризующие сигнальную способность рецептора EP, в основном использовали клетки, которые сверхэкспрессируют либо EP2, либо EP4 (22, 23, 25, 48–50), что затрудняет определение дифференциального вклада рецепторов, когда они совместно экспрессируются. . Здесь мы рассмотрели этот вопрос и измерили раннее начало продукции цАМФ в клетках, которые эндогенно экспрессируют как EP2, так и EP4.Используя селективные антагонисты EP2 и EP4, мы продемонстрировали, что EP2 индуцирует устойчивый цАМФ, тогда как производство цАМФ, опосредованное EP4, происходит быстрее, но более кратковременно. Это различие может частично объясняться тем фактом, что EP4, а не EP2, интернализуется вскоре после стимуляции PGE2, что останавливает дальнейшую передачу сигналов (23, 51). Кроме того, наши результаты, показывающие устойчивую продукцию цАМФ, индуцированную EP2, согласуются с предыдущим наблюдением, что EP2 является основным генератором цАМФ после продолжительной стимуляции PGE2 (48).Мы также знаем, что EP4 может связываться как с Gα _s, так и с Gα _i (22). Здесь мы предоставляем дополнительные доказательства того, что Gα _i связан только с EP4, а не с EP2, и что Gα _i ослабляет ответ цАМФ, вызванный низкими концентрациями PGE2. Учитывая, что несколько GPCR не связываются заранее с Gα _i (52), было бы важно определить, как и когда взаимодействуют EP4 и Gα _i. В недавнем исследовании скрытое марковское моделирование разделило G-белки на четыре состояния диффузии, из которых два самых медленных состояния представляют G-белки, которые взаимодействуют в горячих точках для активации GPCR (53).В том же исследовании использовалось отслеживание отдельных молекул, чтобы показать, что адренергические рецепторы и белки Gα _i только временно взаимодействуют в этих горячих точках (53). Методы визуализации одиночных молекул являются отличным инструментом для понимания фундаментальных принципов динамики G-белка и могут быть использованы для лучшего понимания молекулярных механизмов, регулирующих пространственно-временное взаимодействие между EP4 и Gα _s или Gα _i, которые могут влиять на продукцию цАМФ. профиль.

Наши измерения FRET также показывают, что цАМФ-ответ EP4 зависит от дозы, тогда как EP2-индуцированная продукция цАМФ незначительна при низких концентрациях PGE2 и сильна при высоких концентрациях PGE2.EP4 имеет более высокое сродство к PGE2, чем EP2, на что указывают константы диссоциации 0,59 и 13 нМ соответственно (54). Высокое сродство EP4 объясняет его чувствительность к низким концентрациям PGE2, но очевидная невосприимчивость EP2 к концентрациям PGE2 ниже 1 мкМ не может быть объяснена его более низким сродством к PGE2, исходя из величины его константы диссоциации. Следовательно, могут существовать дополнительные механизмы, которые опосредуют ответ EP2 по принципу «все или ничего» и могут включать гетеро- или гомоолигомеризацию рецептора, которые задокументированы для других GPCR (55), но еще предстоит идентифицировать для EP2 и EP4.Важно отметить, что наши результаты показывают, что EP4 является основным продуцентом и регулятором продукции цАМФ при низких, возможно физиологических, концентрациях PGE2, тогда как EP2 повышает уровни цАМФ только тогда, когда концентрация PGE2 увеличивается выше определенного порога, что может (локально) происходить при воспалении или опухоли ткани.

Интересно, что наши эксперименты с использованием биосенсора cAMP FRET показывают, что EP2 и EP4 оба сигнализируют сильнее при селективной стимуляции. Это указывает на то, что одновременная активация обоих рецепторов ограничивает эффективную передачу сигналов и предполагает наличие перекрестной передачи сигналов между EP2 и EP4.Поскольку и EP2, и EP4 соединяются с Gα _s, конкуренция за нижестоящие эффекторы может вносить вклад в ослабленный ответ цАМФ, наблюдаемый в отсутствие антагонистов рецепторов. Кроме того, ингибирующие взаимодействия между активированными рецепторами на плазматической мембране могут ослаблять PGE2-индуцированный ответ цАМФ, чтобы установить интегрированный сигнал, который точно регулирует последующие эффекты. Хотя механизмы, лежащие в основе этих потенциальных перекрестных помех, еще предстоит расшифровать, наши результаты строго указывают на то, что оси передачи сигналов EP2 и EP4 могут быть тесно переплетены.

Организация передачи сигналов GPCR ранее была связана с мембранными доменами и сетью кортикальных микротрубочек (56). Здесь мы показываем, что интактная сеть микротрубочек (и, возможно, динамические свойства микротрубочек тоже, как показано на Supplementary Figure 2B) необходима для эффективной передачи сигналов как EP2, так и EP4. Примечательно, что несколько других исследований показывают, что продукция цАМФ подавляется интактными микротрубочками и липидными мембранными доменами (56-58). В частности, было предложено, чтобы микротрубочки ограничивали взаимодействия Gα _s с GPCR и AC, ограничивая эффективность ответов цАМФ (57, 59).Тем не менее, большинство предыдущих исследований было сосредоточено на адренергических рецепторах, которые в основном локализуются в доменах липидных рафтов (60). Напротив, нечувствительность рецепторов EP к истощению холестерина предполагает, что EP2 и EP4 в основном локализуются в областях, не являющихся рафтами (61). Более того, изоформа 2 AC, которая является изоформой AC, которая наиболее сильно реагирует на PGE2, также расположена в доменах, не являющихся рафтами, что дополнительно подтверждает мнение о том, что передача сигналов PGE2 происходит вне липидных рафтов и, возможно, объясняет их дифференциальную зависимость от сети микротрубочек, которая сообщалось о адренергических рецепторах (61).Хотя механистическое объяснение все еще отсутствует, различная чувствительность EP2 и EP4 к разрыву микротрубочек поразительна: тогда как передача сигналов PGE2-EP4 частично снижена, передача сигналов PGE2-EP2 полностью отменяется обработкой нокодазолом. Визуализация микротрубочек в сочетании с одночастичным отслеживанием рецепторов EP может выявить роль микротрубочек в передаче сигналов PGE2. Кроме того, требуется подробное молекулярное исследование динамики Gα _s и Gα _i для точного описания организации и рецепторного связывания различных задействованных белков Gα.Различная чувствительность EP2 и EP4 к нокодазолу вместе с явно противоречивыми результатами между адренергическими и простагландиновыми рецепторами сильно подчеркивает сложность пространственно-временной организации GPCR и важность изучения регуляции специфического рецептора в его эндогенных условиях.

На основании наших экспериментальных наблюдений мы здесь представляем схематическую модель ответов цАМФ, установленных EP2 и EP4. При селективной стимуляции EP4 активируются как белки Gα _s, так и Gα _i (рис. 5A).Активные белки Gα _s модулируют активность AC, что приводит к сильному ответу цАМФ. Gα _i предназначен для точной настройки производства цАМФ при низких концентрациях PGE2. Поскольку EP4 подвергается десенсибилизации и интернализации (23, 25), вызванный ответ цАМФ со временем ослабевает. Когда вместо этого избирательно стимулируется EP2, только Gα _s контролирует активность AC (фиг. 5B). Результирующий ответ цАМФ не ослабевает, потому что EP2 нечувствителен к десенсибилизации и интернализации рецептора (23).Нарушение сети микротрубочек снижает уровни цАМФ, индуцированные как EP2, так и EP4, хотя и с разной силой, показывая, что микротрубочки играют важную роль в организации передачи сигналов рецептора EP. При одновременной активации EP2 и EP4 белки Gα активируются как EP2, так и EP4, что приводит к интегрированному ответу цАМФ (рис. 5C). Конкуренция между EP2 и EP4 за Gα _s, вероятно, снижает эффективность передачи сигналов отдельных рецепторов и, таким образом, снижает конечные уровни цАМФ.Поскольку EP4 имеет более высокое сродство к PGE2, чем EP2 (54), EP4 является основным привратником уровней цАМФ, особенно при низких концентрациях PGE2, в то время как EP2 становится важным только при высоких концентрациях PGE2, которые приводят к сильному и устойчивому производству цАМФ.

Рисунок 5 Схематический обзор ответов циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), индуцированных EP2 и EP4. (A) Когда активен только EP4, как Gα _s, так и Gα _i контролируют активность AC. Gα _s вызывает дозозависимый ответ цАМФ, который подавляется Gα _i.Сигнал цАМФ со временем ослабевает и ослабляется за счет разрушения микротрубочек. (B) Когда EP2 активируется избирательно, только Gα _s модулирует активность AC. Результирующий ответ цАМФ бывает слабым или сильным, не ослабевает и полностью зависит от интактной сети микротрубочек. (C) Когда активны и EP2, и EP4, конкуренция за Gα _s ослабляет интегрированный ответ цАМФ. Перекрестная передача сигналов между EP2 и EP4 позволяет клетке по-разному реагировать на простагландин E2 (PGE2) в зависимости от организации и экспрессии EP2 и EP4.

Сообщалось о повышенных концентрациях PGE2 в микроокружении опухоли нескольких типов рака (9–12). Поскольку PGE2 регулирует функцию иммунных клеток, было доказано, что избирательная модуляция сигнальных путей рецептора EP усиливает противоопухолевый иммунный ответ (62–64). Дальнейшее понимание согласованного действия EP2 и EP4 будет иметь важное значение для эффективного контроля клеточных ответов на PGE2.

Заявление о доступности данных

Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без излишних оговорок.

Вклад авторов

WV, KD, BJ, SK провели эксперименты и проанализировали данные. DL предоставила аналитические инструменты. WV, KD, DL и AC написали рукопись при участии всех авторов. DL и AC контролировали весь проект. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Эта работа была поддержана грантом Human Frontiers Science Program, предоставленным DL и AC (RGY0074 / 2008), и грантом NIH R35GM-126934, предоставленным DL.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Эксперименты по микроскопии в основном проводились в Технологическом центре Radboudumc Microscopy, за исключением измерений FLIM, которые проводились в Университете Твенте, Энсхеде, Нидерланды.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https: // www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2020.613286/full#supplementary-material

Ссылки

3. Коулман Р.А., Смит В.Л., Нарумия С. Классификация простаноидных рецепторов Международного союза фармакологии: свойства, распределение и структура рецепторы и их подтипы. Pharmacol Rev (1994) 46: 205–29.

PubMed Аннотация | Google Scholar

4. Legler DF, Bruckner M, Uetz-von Allmen E, Krause P. Новый взгляд на простагландин E2: новое понимание функционального разнообразия открывает терапевтические возможности. Int J Biochem Cell Biol (2010) 42: 198–201. doi: 10.1016 / j.biocel.2009.09.015